МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ХЛОРОРГАНИЧЕСКИХ ПЕСТИЦИДОВ В ВОДЕ, ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ТАБАЧНЫХ ИЗДЕЛИЯХ ХРОМАТОГРАФИЕЙ В ТОНКОМ СЛОЕ (утв. Минздравом СССР 28.01.1980 n 2142-80)


Утверждаю
Заместитель Главного
государственного
санитарного врача СССР
А.И.ЗАИЧЕНКО
28 января 1980 г. N 2142-80
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ХЛОРОРГАНИЧЕСКИХ ПЕСТИЦИДОВ
В ВОДЕ, ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ТАБАЧНЫХ
ИЗДЕЛИЯХ ХРОМАТОГРАФИЕЙ В ТОНКОМ СЛОЕ
Данная методика апробирована и рекомендована в качестве официальной группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками при МСХ СССР.
Настоящие Методические указания распространяются на определение содержания ДДТ, ДДЭ, ДДД, гексохлорана, альдрина, кельтана, гептахлора, метоксихлора, дактала, тедиона и эфирсульфоната в воде, почве, вине, овощах, фруктах, грибах, зерне, комбикормах, корнеклубнеплодах и зеленых кормах, рыбе, мясе, мясопродуктах, внутренних органах, молоке и молочных продуктах, животном жире, сливочном и растительных маслах, жмыхах, шротах, лузге, меде, сахаре, яйцах и яйцепродуктах, а также в табачных изделиях.
1. Характеристика анализируемых пестицидов
Краткая характеристика препаратов представлена в табл. 1.
Таблица 1
ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ПЕСТИЦИДОВ
----T------------T---------------T------------T------T--------------T--------------¬
¦ N ¦ Пестицид ¦ Химическое ¦Эмпирическая¦ Мол. ¦Темп., град. C¦Растворимость ¦
¦п/п¦ ¦ название ¦ формула ¦масса +-------T------+-----T--------+
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦плавле-¦кип., ¦ в ¦ в орг. ¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ния ¦мм рт.¦воде ¦растворе¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ст. ¦ ¦ ¦
+---+------------+---------------+------------+------+-------+------+-----+--------+
¦1. ¦Альдрин ¦1,2,3,4,10,10- ¦C12H8Cl6 ¦364,92¦104 - ¦ ¦н ¦гексан, ¦
¦ ¦ ¦гексахлор-1, ¦ ¦ ¦105 ¦ ¦ ¦бензол, ¦
¦ ¦ ¦4-эндо-5, ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ацетон, ¦
¦ ¦ ¦8-экзо-димети- ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦спирты и¦
¦ ¦ ¦лен-1,4,4а,5,8,¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦др. ¦
¦ ¦ ¦8а-гексагидро- ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦нафталин ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦2. ¦Гексахлоран ¦1,2,3,4,5,6- ¦C6H6Cl6 ¦290,82¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦гексахлорцикло-¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦гексан ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦3. ¦Гексахлор- ¦1,2,3,4,5,6- ¦C6Cl6 ¦264,8 ¦231 ¦322 ¦тр-р ¦бензол, ¦
¦ ¦бензол ¦гексахлорбензол¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦спирты, ¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦четырех-¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦хлорист.¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦углерод,¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦керосин,¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦бензол ¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦4. ¦Гептахлор ¦1,4,5,6,7,8- ¦C10H5Cl7 ¦373,5 ¦95 - 96¦117 - ¦н ¦цикло- ¦
¦ ¦ ¦гептахлор-4, ¦ ¦ ¦ ¦196 ¦ ¦гексан, ¦
¦ ¦ ¦7-эндо-метилен-¦ ¦ ¦ ¦(0,05)¦ ¦ксилол, ¦
¦ ¦ ¦3а,4,7,7а-тет- ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦четырех-¦
¦ ¦ ¦рагидроинден ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦хлор. ¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦углерод,¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦керосин,¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦бензол ¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦5. ¦п,п" ДДД ¦4,4"-дихлорди- ¦C14H10Cl4 ¦320,0 ¦112 ¦ ¦н ¦ацетон, ¦
¦ ¦ ¦фенилдихлорме- ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦бензол, ¦
¦ ¦ ¦тилметан ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦гексан и¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦др. ¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦6. ¦п,п" ДДТ ¦4,4"-дихлорди- ¦C14H9Cl5 ¦354,5 ¦108,5 -¦185 ¦0,001¦ацетон, ¦
¦ ¦ ¦фенилтрихлорме-¦ ¦ ¦109 ¦(1) ¦ ¦бензол, ¦
¦ ¦ ¦тилметан ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦гексан, ¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦спирты и¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦др. ¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦7. ¦п,п" ДДЭ ¦4,4-дихлорди- ¦C14H9Cl4 ¦318,0 ¦ ¦ ¦0,014¦ацетон, ¦
¦ ¦ ¦фенилдихлорэти-¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦гексан, ¦
¦ ¦ ¦лен ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦бензол ¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦8. ¦Дактал ¦Диметилтетра- ¦C10H604Cl4 ¦332,0 ¦156 ¦ ¦ ¦ацетон, ¦
¦ ¦ ¦хлортерефталат ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦гексан, ¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦бензол, ¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦хлоро- ¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦форм ¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦9. ¦Кельтан ¦4,4"-дихлорди- ¦C14H9OCl5 ¦370,4 ¦78,5 - ¦225 ¦н ¦толуол, ¦
¦ ¦(Хлорэтанол)¦фенилтрихлор- ¦ ¦ ¦79 ¦ ¦ ¦хлоро- ¦
¦ ¦Кетан ¦метилкарбинол ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦форм, ¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦серный ¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦эфир, ¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦гексан, ¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦бензол, ¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦спирты ¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦10.¦Метоксихлор ¦4,4"-диметокси-¦C16H15O2Cl3 ¦345,65¦70 - 85¦ ¦тр-р ¦ацетон, ¦
¦ ¦ ¦дифенилтрихлор-¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦четырех-¦
¦ ¦ ¦метилметан ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦хлорис- ¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦тый уг- ¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦лерод, ¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦хлоро- ¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦форм, ¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦бензол и¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦др. ¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦11.¦Тедион ¦4-Хлорфенил- ¦C12H6O2Cl4S ¦356,07¦146 - ¦ ¦0,02 ¦бензол, ¦
¦ ¦ ¦2,4,5-трихлор- ¦ ¦ ¦147 ¦ ¦(56) ¦ксилол, ¦
¦ ¦ ¦фенилсульфон ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦толуол, ¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦хлоро- ¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦форм ¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦12.¦Эфирсульфо- ¦4-хлорфенил- ¦C12H8Cl2SO3 ¦303,06¦86,5 ¦ ¦н ¦ацетон, ¦
¦ ¦нат ¦4-хлорбензол ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦дихлор- ¦
¦ ¦ ¦сульфонат ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦этан, ¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ксилол, ¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦цикло- ¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦гексан, ¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦четырех-¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦хлорис- ¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦тый уг- ¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦лерод ¦
L---+------------+---------------+------------+------+-------+------+-----+---------
2.1. Принцип метода. Метод основан на хроматографии хлорсодержащих пестицидов в тонком слое окиси алюминия, силикагеля или пластинок "Силуфол" в различных системах подвижных растворителей после экстракции их из исследуемых образцов и очистке экстрактов. Подвижным растворителем служит н-гексан или н-гексан в смеси с ацетоном. Места локализации препаратов обнаруживают после опрыскивания пластинок раствором аммиаката серебра с последующим ультрафиолетовым облучением или после облучения ультрафиолетовым светом пластинок "Силуфол", содержащих о-толидин.
2.2. Метрологическая характеристика метода
Метрологическая характеристика метода приведена в таблице 2.
Таблица 2
МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА
МЕТОДА ОПРЕДЕЛЕНИЯ ХЛОРОРГАНИЧЕСКИХ ПЕСТИЦИДОВ
Диапазон определяемых концентраций 0,005 - 2,0 мг/кг или мг/л
--------------T------T------T------T-------T------T-------T------¬
¦Анализируемая¦Предел¦Число ¦Размах¦Среднее¦Стан- ¦Относи-¦Дове- ¦
¦ проба ¦обна- ¦парал-¦варьи-¦значе- ¦дарт- ¦тельное¦ри- ¦
¦ ¦руже- ¦лель- ¦рова- ¦ние оп-¦ное ¦стан- ¦тель- ¦
¦ ¦ния ¦ных ¦ния, %¦ределе-¦откло-¦дартное¦ный ¦
¦ ¦мг/л ¦опре- ¦ ¦ния, % ¦нение,¦откло- ¦интер-¦
¦ ¦или ¦деле- ¦ ¦ ¦% ¦нение, ¦вал ¦
¦ ¦мг/кг ¦ний ¦ ¦ ¦ ¦% ¦ ¦
+-------------+------+------+------+-------+------+-------+------+
¦Вода ¦0,005 ¦7 ¦20 ¦93 ¦10 ¦10,7 ¦7,7 ¦
¦Вино ¦0,005 ¦7 ¦25 ¦90 ¦12 ¦13,3 ¦9,0 ¦
¦Овощи ¦0,05 ¦7 ¦20 ¦83 ¦12 ¦14,4 ¦9,0 ¦
¦Фрукты ¦0,05 ¦6 ¦20 ¦81 ¦9 ¦11,1 ¦7,4 ¦
¦Зерно ¦0,05 ¦7 ¦25 ¦75 ¦10 ¦13,3 ¦7,5 ¦
¦Трава ¦0,025 ¦10 ¦30 ¦74 ¦12 ¦16,2 ¦7,6 ¦
¦Рыба ¦0,05 ¦10 ¦24 ¦83 ¦12 ¦14,4 ¦7,6 ¦
¦Мясо ¦0,05 ¦10 ¦30 ¦87 ¦15 ¦17,2 ¦9,5 ¦
¦Животный жир ¦0,04 ¦6 ¦26 ¦82 ¦12 ¦14,6 ¦9,9 ¦
¦Молоко, слив-¦0,04 ¦13 ¦30 ¦86 ¦16 ¦18,6 ¦8,9 ¦
¦ки, творог ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦Сливочное ¦0,05 ¦8 ¦30 ¦83 ¦17 ¦20,0 ¦12,0 ¦
¦масло ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦
¦Сахар ¦0,02 ¦6 ¦6 ¦97 ¦5 ¦5,1 ¦4,1 ¦
¦Почва ¦0,06 ¦ ¦ ¦70 ¦9 ¦ ¦7,9 ¦
L-------------+------+------+------+-------+------+-------+-------
2.3. Реактивы и растворы
Ацетон хч, ГОСТ 2603-71
Аммиак водный хч, ГОСТ 3760-64
Алюминия окись 2 ст. активности для хроматографии, ч, МРТУ 6-09-5296-68. Просеивают через сито 100 меш.
Алюминия окись, пропитанная серной кислотой. Две весовые части окиси алюминия (или окиси кремния) помещают в фарфоровую ступку, заливают одной объемной частью серной кислоты и тщательно перемешивают. Смесь готовят непосредственно перед подготовкой колонок для очистки экстрактов из проб шротов, жмыха, лузги
Бензол хч, ГОСТ 5955-68
Н-гексан ч, МРТУ 6-09-2937-66
Калий щавелевокислый чда, ГОСТ 5868-68
Кальций сернокислый чда, ГОСТ 3210-66. Просушивают 6 часов в сушильном шкафу при 160 град. C. Просеивают через сито 100 меш.
Кремния окись для люминофоров ч, МРТУ 6-09-4875-67
Натрий сернокислый безводный ч, ГОСТ 4166-66
Натрий углекислый кислый хч, ГОСТ 4201-66, 0,5 н. раствор
Натрий хлористый хч, ГОСТ 4233-66, насыщенный раствор
Петролейный эфир (темп. кип. 40 - 70 град.)
Перекись водорода хч (30% водный раствор), ГОСТ 10929-64
Проявляющие реактивы:
Проявляющий реактив N 1. 0,5 г азотнокислого серебра растворяют в 5 мл дистиллированной воды, прибавляют 7 мл аммиака и доводят объем раствора до 100 мл ацетоном; в готовый раствор можно добавить 0,2 мл перекиси водорода. Раствор следует хранить в колбе с притертой пробкой в темном месте в течение 3-х дней. На пластинку 9 x 12 см расходуется 8 - 10 мл раствора.
Проявляющий реактив N 2. 0,5 г азотнокислого серебра растворяют в 5 мл дистиллированной воды, добавляют 10 мл 2-феноксиэтанола и доводят объем раствора до 200 мл ацетоном, затем добавляют 6 капель 30-процентной перекиси водорода.
Серебро азотнокислое чда, ГОСТ 1277-63
Серная кислота ч, ГОСТ 4204-66
Силикагель АСК (Воскресенского химкомбината Московской обл.)
Силикагель КСК, просеянный через сито 100 меш.
Стандартные образцы:
ДДТ, ДДД, ДДЭ, альдрин, изомеры ГХЦГ, гептахлор, метоксихлор, кельтан, эфирсульфонат, дактал, тедион хч.
Стандартные растворы: 10 мг соответствующего пестицида растворяют в мерной колбе на 100 мл в н-гексане и доводят до метки этим растворителем. Стандартные растворы необходимо хранить в стеклянной посуде с притертыми пробками в холодильнике.
Стеклянная вата, очищенная конц. серной кислотой, промытая дистиллированной водой и высушенная
о-Толидин ч, МРТУ 6-09-6337-69, 1% раствор в ацетоне
2-феноксиэтанол
Этиловый спирт, ректификат, ТУ 19-11-39-69
Хлороформ хч, ГОСТ 200-15-74
Четыреххлористый углерод хч, ГОСТ 20228-74
Этиловый эфир (для наркоза), Фармакопея СССР
Натрий сернокислый, 2% водный раствор
Натрий сернокислый, насыщенный раствор
2.4. Приборы и посуда
Баня водяная, ТУ 64-1-2850-76
Вакуумно-ротационный испаритель, ИР ТУ 25-11-310-69 или прибор для отгонки растворителей, МРТУ 25-11-67-67
Воронки химические, диам. 6 см, ГОСТ 86-13-64
Воронки делительные, емкостью 100, 250, 500 мл, ГОСТ 10054-75
Воронки Бюхнера, ГОСТ 9147-69
Гомогенизатор или измельчитель тканей
Камера для опрыскивания, ТУ 25-11-430-70
Камера для хроматографирования, размером 150 x 200, 105 x 165 мм, ГОСТ 10565-63
Колбы Бунзена, ТУ 25-11-135-69
Колбы мерные, емкостью 50, 100 мл, ГОСТ 1770-74
Колбы нш, емкостью 100, 250, 500 мл, ГОСТ 10394-63
Колбы круглодонные нш, емкостью 150, 250, 500 мл, ГОСТ 10394-63
Микропипетки, ГОСТ 1770-74 (для нанесения стандартных растворов)
Пипетки или шприцы для нанесения проб
Пипетки емкостью 1, 5, 10 мл, ГОСТ 1770-74
Прибор для встряхивания, МРТУ 2451-64
Пластинки стеклянные 9 x 12, 13 x 18 см
Пульверизаторы стеклянные для опрыскивания пластинок
Сито на 100 меш (диаметр отверстий 0,147 мм)
Стеклянные хроматографические колонки (диаметр - высота), 20 x 400, 15 x 150
Ртутно-кварцевая лампа
Цилиндры мерные емкостью 25, 50, 100, 250, 500 мл, ГОСТ 1770-74
Чашки выпарительные N 3, N 1, ГОСТ 9147-69
Приготовление пластинок для хроматографии
Тщательно промытую хромовой смесью, раствором соды, дистиллированной водой и высушенную пластинку протирают этиловым спиртом или эфиром и покрывают сорбционной массой. Массу готовят следующим образом:
а) 50 г просеянной через сито 100 меш. окиси алюминия смешивают в фарфоровой ступке с 5 г сернокислого кальция, прибавляют 75 мл дистиллированной воды и перемешивают в ступке или колбе до образования однородной массы. На пластинку 9 x 12 см наносят 10 г сорбционной массы (на пластинку 13 x 18 см - 20 г) и, покачивая, равномерно распределяют по всей пластинке. Пластинки сушат при комнатной температуре 18 - 20 часов, можно сушить их 20 минут при комнатной температуре, а затем 45 минут в сушильном шкафу при температуре 110 град. C.
б) 35 г силикагеля КСК, просеянного через сито 100 меш., смешивают с 2 г сернокислого кальция и 90 мл дистиллированной воды и перемешивают в ступке или колбе до однородной массы. Наносят на пластинки и сушат, как указано выше. Порция рассчитана на 10 пластинок.
Если пластинки с тонким слоем силикагеля темнеют после облучения УФ-светом, силикагель перед употреблением следует очистить от примесей. Для этого силикагель заливают на 18 - 20 часов разбавленной соляной кислотой (1:1), кислоту сливают, промывают силикагель водой и кипятят в круглодонной колбе 2 - 3 часа с разбавленной азотной кислотой (1:1), промывают проточной водопроводной, затем дистиллированной водой до нейтральной реакции промывных вод, сушат в сушильном шкафу 4 - 6 часов при температуре 130 град. Силикагель дробят и просеивают через сито 100 меш.
Пластинки для хроматографии "Силуфол" UV-254 производства ЧССР перед использованием импрегнируют о-толидином. Для этого каждую пластинку опускают на 0,5 см в 0,1% раствор о-толидина в ацетоне, налитый в камеру для хроматографирования. После того как фронт растворителя поднимется до верхнего края пластинки, ее вынимают и высушивают на воздухе, избегая прямого солнечного света. После этого пластинки готовы к употреблению. Пластинки, импрегнированные о-толидином, хранят в эксикаторе. Используют при анализе кормов.
Пластинки "Силуфол" UV-254 производства ЧССР предварительно промывают дистиллированной водой в хроматографической камере, высушивают на воздухе и непосредственно перед использованием активизируют в сушильном шкафу при температуре 65 град. в течение 4 минут.
Подготовка хроматографических колонок для очистки экстрактов
Хроматографическая колонка для очистки от молочного жира. В нижнюю часть хроматографической колонки (размером 20 x 400 мм) помещают стекловату или 500 мг обезжиренной ваты. Затем засыпают в колонку силикагель АСК (75 мл для очистки экстрактов из проб свиного жира и 70 мл для всех остальных проб) и уплотняют силикагель постукиванием по колонке. Колонку промывают 50 мл н-гексана или петролейного эфира, и прошедший через нее растворитель отбрасывают. После этого колонка готова для хроматографической очистки экстрактов из проб рыбы, мяса и мясопродуктов, молока и молокопродуктов, меда, яиц и т.д.
Хроматографическая колонка для очистки экстрактов из проб шротов (необогащенных липидами) и лузги.
Хроматографическую колонку заполняют на высоту 1 см стеклянной ватой, затем в колонку вносят просеянную окись алюминия (I) слоем 2,5 см или окись кремния - 3,5 см. Далее засыпают, не утрамбовывая, комочки окиси алюминия (кремния), пропитанные серной кислотой, высота слоя (II) 2,5 см. Каждый слой последовательно промывают гексаном (всего 20 - 30 мл).
Для анализа жмыхов и шротов, обогащенных липидами, слои окиси алюминия следует увеличить до 5 см (I) и 3 см (II) соответственно, в случае использования окиси кремния - 6 см (I) и 3 см (II).
2.5. Проведение определения
Вода, вино. 200 мл пробы помещают в делительную воронку и экстрагируют пестициды, встряхивая в течение 3-х минут н-гексаном или петролейным эфиром тремя порциями по 30 мл или диэтиловым эфиром тремя порциями по 50 мл. В объединенные экстракты насыпают 10 г безводного сернокислого натрия или фильтруют через воронку, заполненную на 2/3 сернокислым натрием. Экстракты переносят в прибор для отгонки растворителей и отгоняют растворитель до объема 0,2 - 0,3 мл. В случае необходимости экстракт чистят серной кислотой.
Овощи, фрукты. 20 г измельченной пробы помещают в колбу с притертой пробкой и проводят экстрагирование пестицидов трижды в течение 15 минут на аппарате для встряхивания н-гексаном или петролейным эфиром порциями по 30 мл. Объединенные экстракты сушат безводным сернокислым натрием, переносят в прибор для отгонки растворителей, отгоняют растворитель до объема 0,2 - 0,3 мл и наносят на пластинку.
Зерно, грибы. Из измельченных проб отбирают 20 г зерна, 50 г сырых или 10 г сухих грибов и помещают в колбы с притертыми пробками. Экстракцию пестицидов проводят трижды на приборе для встряхивания н-гексаном или петролейным эфиром порциями по 30 мл. Объединенные экстракты переносят в делительную воронку, прибавляют 10 мл насыщенного раствора безводного сернокислого натрия в серной кислоте и осторожно встряхивают несколько раз. Отделяют органический слой и повторяют обработку до тех пор, пока кислота не станет бесцветной. Экстракт промывают дистиллированной водой, сушат безводным сернокислым натрием и отгоняют растворитель.
Яблоки, капуста, трава, сено. 20 г измельченных яблок, 20 г капусты, 40 г травы и 20 г сена заливают 100 мл ацетона в колбе с притертой пробкой. Встряхивают 2 - 3 минуты, прибавляют 20 мл дистиллированной воды и охлаждают на льду 30 минут. Экстракт сливают и фильтруют холодным, экстракцию повторяют. Из объединенных водно-ацетоновых экстрактов отгоняют ацетон, а из водного остатка экстрагируют препараты н-гексаном тремя порциями по 10 мл в течение 10 минут. Гексановые экстракты очищают серной кислотой, насыщенной безводным сернокислым натрием. Сушат безводным сернокислым натрием. Отгоняют растворитель до небольшого объема и наносят на пластинку. Если очистка неполная (после испарения растворителя на колбе остается белый налет), экстракт испаряют досуха, остаток смывают холодным ацетоном 3 раза порциями по 0,2 мл и сразу наносят на пластинку.
Комбикорма. Для исследования берут навеску 40 г, увлажняют ее в колбе 60 мл дистиллированной воды. Увлажненную навеску оставляют на ночь в колбе, закрытой пробкой. Экстракцию пестицидов проводят дважды 50 - 100 мл смеси гексан - ацетон 1:1 при встряхивании в течение 2 часов. Экстракты объединяют в делительной воронке на 500 мл, прибавляют дважды по 50 мл дистиллированной воды и, после разделения слоев, нижний водный слой сливают в другую делительную воронку и экстрагируют пестициды 40 мл гексана. Водный слой сливают. Гексановые экстракты объединяют, фильтруют через воронку с бумажным фильтром, заполненным на 2/3 безводным сернокислым натрием. Экстракты упаривают на ротационном испарителе до объема 20 - 30 мл или досуха, растворяя затем сухой остаток в 20 - 30 мл гексана или петролейного эфира. Экстракт переносят в делительную воронку и производят очистку серной кислотой, как описано выше.
Шрот, лузга, жмых. Навески: 15 г обогащенного липидами шрота или жмыха; 20 г не обогащенного липидами шрота или лузги делят на равные части и помещают в колбы емкостью 100 - 250 мл с притертыми пробками, заливают гексаном (три объема гексана на одну весовую часть шрота), встряхивают на приборе для встряхивания 30 минут. Экстракт фильтруют через воронку Бюхнера, не перенося осадок на воронку. В колбу повторно заливают указанное количество гексана, встряхивают 30 минут, фильтруют, количественно переносят осадок на воронку Бюхнера с помощью 30 мл гексана (3 раза по 10 мл). Полученный экстракт выпаривают до 30 мл на ротационном испарителе или в токе воздуха при температуре не выше 40 град., остаток делят на две равные части и помещают в морозильную камеру холодильника на 1 час (не менее). Каждую часть пропускают через отдельную колонку с окисью алюминия со скоростью 2 мл/минуту, промывают колбу и колонку 50 мл охлажденной смеси этилового эфира с гексаном (15:85). Эту операцию необходимо проводить без перерыва, не оставляя на следующий день. Очищенные экстракты объединяют и упаривают до объема 1 мл. Остаток из колбы переносят количественно микропипеткой с помощью резиновой груши в пробирку на 1 мл, колбу и микропипетку 2 - 3 раза промывают небольшим количеством гексана (всего 0,3 - 0,5 мл), сливая его в ту же пробирку. Затем осторожно выпаривают гексан из пробирки на водяной бане при температуре 50° почти досуха (конечный объем приблизительно 2 - 3 капли). Если общий объем экстракта и промывной жидкости превышает 1 мл, то сначала выпаривают экстракт, постепенно прибавляя к нему промывную жидкость. При наличии в упаренном экстракте белого мазеобразного осадка в пробирку добавляют 5 - 6 капель гексана и помещают ее на 15 - 20 минут в морозильную камеру холодильника, затем деканируют дважды таким же количеством гексана и снова упаривают до конечного объема 2 - 3 капли.
Параллельно с исследуемыми образцами готовят два модельных экстракта. Каждый экстракт получают из одного грамма шрота, не содержащего пестицидов (соотношение сухого вещества и пестицида то же, что и в исследуемых образцах). В один из экстрактов перед очисткой на колонках вносят микрошприцем (микропипеткой) определяемые пестициды в количестве 3 мкг, в другой - 0,75 мкг. Упаренные исследуемые и модельные экстракты с помощью микропипетки или микрошприца количественно наносят на пластинку, трижды смывая пробирку небольшим количеством гексана.
Рыба, мясо и мясопродукты. Мясо, мясопродукты пропускают через мясорубку. Рыбу очищают от чешуи, внутренних органов и тоже пропускают через мясорубку. 20 г пробы перемешивают с безводным сернокислым натрием и помещают в колбу с притертой пробкой. Пестициды экстрагируют дважды смесью гексан - ацетон или петролейный эфир - ацетон в соотношении 1:1 порциями по 50 мл в течение 1,5 часов при встряхивании. Экстракт фильтруют через воронку с бумажным фильтром, заполненным на 2/3 безводным сернокислым натрием, затем растворитель отгоняют, сухой остаток растворяют в 20 мл н-гексана и вносят его в колонку с силикагелем АСК. После впитывания экстракта в сорбент пестицид элюируют 110 мл смеси бензола с гексаном в соотношении 3:8 порциями по 25 - 30 мл. Элюат собирают в круглодонную колбу со шлифом емкостью 250 - 300 мл. Через 10 минут после впитывания последней порции растворителя сорбент отжимают с помощью груши. Элюат отгоняют до объема 0,1 мл и наносят на хроматографическую пластинку.
В том случае, если пробы мяса или рыбы содержат большое количество жира, после испарения первого экстрагента (смеси ацетона с гексаном) и растворения сухого остатка в гексане следует провести очистку гексанового экстракта серной кислотой, а затем колоночную очистку, как описано выше.
Животный жир, яйца, яичный порошок. Жир измельчают на мясорубке, яичный порошок тщательно перемешивают, яйца - отделяют желток от белка, взвешивают желток и белок, а для анализа берут только желток. Конечный результат о содержании хлорорганических пестицидов в яйце приводят на все яйцо. Желток тщательно перемешивают.
25 г подготовленного образца заливают 50 мл ацетона, перемешивают и нагревают на горячей водяной бане до закипания растворителя. Колбу охлаждают, добавляют в нее 10 мл охлажденного 2% раствора сернокислого натрия, перемешивают и охлаждают 45 минут на ледяной бане. Затем сливают ацетоновый слой в круглодонную колбу через слой обезжиренной ваты. Экстракцию ацетоном с последующим вымораживанием жира повторяют еще два раза. Из объединенных экстрактов отгоняют ацетон на ротационном испарителе или в приборе для отгонки растворителей (температура бани не более 70 град. +/- 2 град.) и трижды экстрагируют петролейным эфиром порциями 20, 10 и 10 мл. Продолжительность первой экстракции 1 час, последующих - 15 минут. Петролейный эфир переносят в делительную воронку с 40 мл 2% водного раствора сернокислого натрия, перемешивают содержимое в течение 2-х минут, дают слоям разделиться и водную фазу отбрасывают. Для улучшения разделения слоев можно добавить несколько мл насыщенного раствора сернокислого натрия. Операцию промывки экстракта повторяют еще два раза, после чего петролейный эфир сливают в стакан с 20 г безводного сернокислого натрия, споласкивают делительную воронку дважды 5 мл петролейного эфира. Подсушенный экстракт количественно переносят в мерный цилиндр на 50 мл и доводят объем раствора петролейным эфиром до 30 мл. Далее наносят 30 мл экстракта в колонку с силикагелем АСК, как указано выше. Для проб свиного жира насыпают 75 мл силикагеля АСК, для всех остальных проб - 70 мл. Очистку экстрактов проводят, как описано для проб мяса. Элюат собирают в круглодонную колбу на 150 мл, растворитель упаривают до объема нескольких капель и наносят на хроматографическую пластинку.
Мед. 30 г меда смешивают с 3 г безводного сернокислого натрия и трижды экстрагируют пестициды гексаном порциями по 30 мл каждый раз по 15 минут, тщательно растирая мед стеклянной палочкой в узком химическом стакане. Экстракты объединяют и отгоняют гексан до объема 30 мл или до меньшего объема, далее доводя экстракт до 30 мл гексаном. 30 мл экстракта вносят в хроматографическую колонку с силикагелем АСК и проводят очистку экстракта и испарение растворителя, как описано выше.
Сахар. Из навески 50 г сахара, предварительно растворенного в воде, пестициды экстрагируют в делительной воронке на 250 мл н-гексаном. Экстракцию пестицидов проводят трижды по 50, 25 и 25 мл растворителя каждый раз встряхивая по 5 минут. Объединенные гексановые экстракты очищают от коэкстрактивных веществ (красящие, аминокислоты, липиды) сернокислотным способом.
Молоко и молочные продукты. Для подготовки проб можно использовать один из приведенных способов.
Первый способ. Сливки, сметана, молоко и др. цельномолочные продукты. Для анализа берут 20 г сливок и сметаны, предварительно разведенных равным объемом дистиллированной воды, 50 мл молока, кефира и т.п., прибавляют концентрированную серную кислоту (30 - 40 мл) до полного почернения пробы. Охлажденный до 10 - 15 град. раствор переносят в делительную воронку и экстрагируют препараты гексаном 2 раза порциями по 25 мл. Для полного извлечения воронку встряхивают 2 минуты, затем оставляют ее на 30 минут до полного разделения слоев. Если образуется эмульсия, прибавляют 1 - 2 мл этилового спирта. К объединенным экстрактам в делительной воронке прибавляют 10 мл концентрированной серной кислоты, насыщенной сернокислым натрием, и осторожно встряхивают несколько раз. Очистку продолжают до получения бесцветной серной кислоты.
Творог, сыр. 50 г творога или 10 г измельченного на терке сыра заливают 40 мл гексана или петролейного эфира, непрерывно встряхивают 2 - 3 минуты и оставляют на 30 минут. Экстракцию повторяют. Объединенные экстракты в делительной воронке очищают серной кислотой, как указано выше.
Второй способ. Молоко, кефир, простокваша, кумыс и другие цельномолочные продукты. 25 мл продукта помещают в делительную воронку на 300 мл, приливают по 5 мл щавелевокислого калия и насыщенного раствора хлористого натрия, перемешивают, приливают 100 мл ацетона, встряхивают 2 минуты. Приливают 100 мл хлороформа и встряхивают 2 мин. Воронку оставляют до полного разделения слоев. Верхнюю фазу отбрасывают, а нижнюю выливают в круглодонную колбу со шлифом и испаряют растворитель досуха. Остаток смывают 30 мл гексана.
Сгущенное молоко, 10 - 20% сливки. К 10 г продукта прибавляют 10 мл насыщенного раствора хлористого натрия и выливают в делительную воронку вместимостью 150 мл. К смеси приливают 40 мл ацетона, встряхивают 2 минуты, приливают 60 мл хлороформа, встряхивают 2 - 3 минуты и оставляют до разделения фаз. Далее поступают, как при определении пестицидов в молоке.
Сгущенные молочные продукты. 10 г продукта помещают в стаканчик, заливают 10 мл воды с температурой 45 - 50 град. C, перемешивают и переносят в делительную воронку на 150 мл, добавляют 5 мл щавелевокислого калия. Содержимое воронки перемешивают, приливают 80 мл ацетона и встряхивают 2 - 3 минуты. Добавляют 100 мл хлороформа и встряхивают 5 - 7 минут. После разделения фаз нижнюю фазу сливают в круглодонную колбу, растворители отгоняют, а сухой остаток растворяют в 30 мл петролейного эфира.
Сухие молочные продукты. 3 г сухих молочных продуктов (сливок 2 г) высыпают в стаканчик, приливают 15 мл дистиллированной воды с температурой 40 - 45 град. C, размешивают и переносят в делительную воронку вместимостью 300 мл, приливают по 5 мл щавелевокислого калия и насыщенного раствора хлористого натрия. Содержимое воронки перемешивают, добавляют 80 мл ацетона и встряхивают 3 - 5 минут, приливают 100 мл хлороформа, встряхивают 5 минут и оставляют на 3 - 5 минут (до разделения фаз). Нижнюю фазу сливают в круглодонную колбу, растворитель отгоняют, а остаток смывают 30 мл гексана.
Сметана, 30 - 40% сливки. 5 г продукта отвешивают в стаканчик, приливают 10 мл насыщенного раствора хлористого натрия и переносят в делительную воронку вместимостью 150 мл. Стаканчик обмывают 40 мл ацетона, смывы переносят в делительную воронку, которую встряхивают 2 - 3 минуты, добавляют 70 мл хлороформа и встряхивают 2 мин. Воронку оставляют на несколько минут до разделения фаз, нижнюю фазу сливают в колбу для отгонки растворителей, растворитель отгоняют, а остаток смывают 30 мл гексана.
Творог, сыр. 10 г творога или измельченного на терке сыра растирают с 10 мл насыщенного раствора хлористого натрия и переносят в делительную воронку на 250 - 300 мл. Прибавляют 80 мл ацетона, встряхивают 2 минуты, приливают 100 мл хлороформа и вновь встряхивают. Нижнюю фазу используют для анализа после отгонки растворителей, растворив остаток в 30 мл гексана.
Далее проводят очистку экстрактов из проб молока и молочных продуктов от молочного жира, подготовленных по второму способу. Для этого 30 мл экстракта наносят в колонку с 70 мл силикагеля АСК. После впитывания экстракта в сорбент пестицид элюируют 110 мл смеси бензола с гексаном в соотношении 3:8 порциями по 25 - 30 мл. Элюат собирают в круглодонную колбу на 250 - 300 мл. Через 10 минут после впитывания последней порции растворителя сорбент отжимают с помощью резиновой груши. После очистки растворители отгоняют под вакуумом.
Сливочное масло. 20 г сливочного масла растапливают на водяной бане в круглодонной колбе, прибавляют 50 мл ацетона, тщательно перемешивают до растворения жира, прибавляют 10 мл ледяной дистиллированной воды и охлаждают на льду до затвердевания жира (примерно 30 минут). Сливают ацетоновый экстракт, и процедуру повторяют еще 2 раза. Из объединенных экстрактов в круглодонной колбе ацетон отгоняют на водяной бане. Пестициды экстрагируют из оставшегося водного экстракта гексаном тремя порциями по 10 мл в течение 5 минут. Объединенные гексановые экстракты в делительной воронке обрабатывают серной кислотой с сернокислым натрием. Очищенный экстракт сушат безводным сернокислым натрием и упаривают.
Почва. К навескам воздушно-сухой почвы (10 г), помещенным в конические колбы емкостью 250 мл, приливают 10 мл 1-процентного водного раствора хлористого аммония и оставляют на сутки закрытыми. Затем приливают смесь 30 мл ацетона и 30 мл гексана и встряхивают колбы в течение часа на встряхивающем устройстве. Содержимое колб переносят в центрифужные пробирки. После центрифугирования жидкую часть сливают в конические колбы, почву с помощью 10 мл 1-процентного раствора хлористого аммония и 30 мл ацетона переносят в исходные конические колбы, добавляют 30 мл гексана и проводят экстракцию еще в течение 30 минут. Затем экстракты объединяют. К объединенным экстрактам в делительной воронке приливают 180 мл дистиллированной воды, осторожно встряхивают в течение 5 - 7 минут, дают жидкостям расслоиться и нижний водный слой сливают в коническую колбу. Гексановый слой пропускают через безводный сульфат натрия (столовая ложка или 30 - 40 г сульфата натрия).
Из водно-ацетонового слоя экстракцию пестицидов проводят еще дважды 15 и 10 мл гексана, который затем сушат через тот же сульфат натрия. Гексановые экстракты объединяют.
Концентрирование экстрактов проводят либо на ротационно-вакуумном испарителе, либо при температуре бани не более 40 град. C и времени отгонки 9 - 11 минут, либо из колбочек с г-образным отводом при температуре водяной бани 72 - 75 град. C.
Очистку сконцентрированных гексановых экстрактов из проб почв проводят серной кислотой, как описано выше для других проб, и испаряют растворитель.
Табак и табачные изделия. 5 г табака помещают в стеклянный стакан на 500 мл, заливают 50 мл концентрированной серной кислоты и стеклянной палочкой тщательно размешивают до полного равномерного обугливания пробы. Спустя 10 - 15 минут в колбу добавляют 25 мл гексана, тщательно размешивают содержимое и прибавляют 20 мл четыреххлористого углерода. Экстракцию пестицидов из пробы проводят в течение 15 минут трижды, после чего экстракт последовательно переносят в делительную воронку для однократной или двукратной дополнительной очистки серной кислотой.
Хроматографирование
На хроматографическую пластинку на расстоянии 1,5 см от ее края шприцем или пипеткой наносят исследуемую пробу в одну точку так, чтобы диаметр пятна не превышал 1 см. Остаток экстракта в колбочке смывают тремя порциями (по 0,2 мл) диэтилового эфира, которые наносят в центр первого пятна. Справа и слева от пробы на расстоянии 2 см наносят стандартные растворы, содержащие 10, 5, 1 мкг исследуемых препаратов (или другие количества, близкие к определяемым концентрациям).
Пластинки с нанесенными растворами помещают в камеру для
хроматографирования, на дно которой за 30 минут до начала
хроматографирования наливают подвижный растворитель. При
использовании пластинок с тонким слоем окиси алюминия или
силикагеля в качестве подвижного растворителя применяют н-гексан
или смесь гексана с ацетоном в соотношении 6:1, для препаратов, у
которых величина R в гексане ниже 0,3. При использовании
f
пластинок "Силуфол" подвижный растворитель - 1% раствор ацетона в
гексане, а пластинок "Силуфол", импрегнированных о-толидином, -
гексан с диэтиловым эфиром в соотношении 49:1. Край пластинки с
нанесенными растворами может быть погружен в подвижный
растворитель не более чем на 0,5 см.
После того как фронт растворителя поднимется на 10 см, пластинку вынимают из камеры и оставляют на несколько минут для испарения растворителя. Далее пластинку орошают проявляющим реактивом и подвергают действию УФ света в течение 10 - 15 минут (лампа ПРК-4). Пластинки следует располагать на расстоянии 20 см от источника света.
При наличии хлорорганических пестицидов на пластинке появляются пятна серо-черного цвета.
При использовании для анализа пластинок "Силуфол", импрегнированных о-толидином, их непосредственно после хроматографирования подвергают УФ-облучению в течение нескольких минут. При наличии хлорорганических пестицидов в этом случае появляются пятна сине-голубого цвета.
Количественное определение осуществляют сравнением площадей пятен пробы и стандартных растворов. Между количеством препарата в пробе, не превышающим 20 мкг, и площадью его пятна на пластинке существует прямая пропорциональная зависимость. При большем содержании препарата следует использовать пропорциональную часть исследуемого экстракта.
2.6. Обработка результатов анализа
Количество препарата в пробе вычисляют по формуле:
A x S
2
X = ------,
P x S
1
где: X - содержание препарата в пробе, мг/кг или мг/л;
A - содержание препарата в стандартном растворе, мкг;
S - площадь пятна стандартного раствора, кв. мм;
1
S - площадь пятна пробы, кв. мм;
2
P - масса или объем исследуемой пробы, г или мл.
3. Требования безопасности
Соблюдаются требования безопасности, обычно рекомендуемые для работы с химическими реактивами и хлорорганическими пестицидами.
Таблица 3
ВЕЛИЧИНА R ХЛОРОРГАНИЧЕСКИХ ПЕСТИЦИДОВ
f
----------------------T--------------------------T-----------------¬
¦ Пестицид ¦ Подвижный растворитель ¦ Величина R ¦
¦ ¦ ¦ f ¦
¦ ¦ +--------T--------+
¦ ¦ ¦на окиси¦на сили-¦
¦ ¦ ¦алюминия¦кагеле ¦
+---------------------+--------------------------+--------+--------+
¦Гексахлорбензол ¦Гексан ¦0,9 ¦- ¦
¦Альдрин ¦Гексан ¦0,83 ¦0,68 ¦
¦ДДЭ ¦-"- ¦0,78 ¦0,66 ¦
¦ДДЭ ¦Гексан + ацетон (6:1) ¦0,87 ¦- ¦
¦Гептахлор ¦Гексан ¦0,76 ¦0,65 ¦
¦2,4-ДДТ ¦-"- ¦0,67 ¦0,54 ¦
¦4,4"-ДДТ ¦-"- ¦0,61 ¦0,50 ¦
¦4,4"-ДДТ ¦Гексан + ацетон (6:1) ¦0,75 ¦- ¦
¦Линдан ¦Гексан ¦0,34 ¦0,20 ¦
¦ДДД ¦-"- ¦0,30 ¦0,40 ¦
¦ДДД ¦Гексан + ацетон (6:1) ¦0,62 ¦- ¦
¦Метоксихлор ¦Гексан ¦0,15 ¦- ¦
¦Метоксихлор ¦Гексан + ацетон (6:1) ¦0,60 ¦- ¦
¦Кельтан ¦Гексан ¦0,05 ¦- ¦
¦Кельтан ¦Гексан + ацетон (6:1) ¦0,40 ¦- ¦
¦Кельтан ¦Бензол ¦0,44 ¦- ¦
¦Тедион ¦Гексан ¦0,03 ¦- ¦
¦Тедион ¦Гексан + ацетон (6:1) ¦0,55 ¦- ¦
¦Эфирсульфонат ¦Гексан ¦0, ¦- ¦
¦Эфирсульфонат ¦Гексан + ацетон (6:1) ¦0,45 ¦- ¦
¦Дактал ¦То же (2:1) ¦0,9 ¦- ¦
L---------------------+--------------------------+--------+---------
В настоящих Методических указаниях обобщены следующие методики определения остаточных количеств хлорорганических пестицидов в пищевых продуктах:
1. М.А. Клисенко, З.Ф. Юркова Определение ДДТ, ДДЭ, ДДД,
(ВНИИГИНТОКС) альдрина, дильдрина, гептахлора,
Л.А. Стемпковская (Киевский метоксихлора, эфирсульфоната и
НИИ гигиены питания) др. ядохимикатов в воде, продуктах
В.В. Молочников, питания и биологических средах
В.И. Мочалов, хроматографией в тонком слое.
А.П. Моргунова (ВНИИМП) Утвержден 30.07.1973, N 1112-73.
Методические указания по
определению микроколичеств
пестицидов в продуктах питания,
кормах и внешней среде, часть VI,
М., 1974
2. А.Б. Белова, Л.В. Новикова, Определение ДДТ, ГХЦГ, альдрина и
Н.И. Шадрина (ВНИИ жиров) гексахлорбензола в обогащенных и
необогащенных липидами хлопковых
шротах. Утвержд. 30.07.1973,
N 1112-73.
Там же
3. Э.И. Бабкина, Методические указания по контролю
Ц.И. Бобовникова, загрязнения почв. Утв. 12.10.1977,
В.В. Егоров, Г.В. Миронюк N 1766. Гидрометеоиздат, 1977
4. А.И. Шумкова, И.Н. Карпова, Определение хлорорганических
С.А. Ликунова, пестицидов в животных жирах, мясе,
Л.Д. Рузанкова (ВНИИМП) яйцах и продуктах их переработки
Н.В. Перетолчин, хроматографией в тонком слое.
Г.П. Угрюмова (ВНИИПП) Утв. 23.01.1975, N 1222-75.
Методические указания по
определению микроколичеств
пестицидов в продуктах питания,
кормах и внешней среде, часть VII,
1977
5. Л.Ф. Васьковская, Методы определения ДДТ, его
А.Л. Бурштейн (ВНИИГИНТОКС) метаболитов и ГХЦГ в табачных
изделиях способом хроматографии в
тонком слое. Утв. 22.09.1975,
N 1350-75.
Там же
6. В.Н. Полякова, Определение ДДТ, ДДД, ДДЭ и гамма-
Г.А. Трондина, Р.Д. Петухов изомера ГХЦГ в мясе, рыбе, органах
(ВИЭВ) и тканях животных, комбикормах,
меде и воде методом тонкослойной
хроматографии.
Справочная книга по ветеринарной
токсикологии, "Колос", 1976
С введением в действие настоящих Методических указаний считать утратившими силу "Методы определения гептахлора в растениях методом тонкослойной хроматографии" и "Метод определения ДДТ, ГХЦГ, альдрина и гексахлорбензола в хлопковых шротах, обогащенных и необогащенных липидами", утвержденные зам. Главного санитарного врача СССР в 1971, а также "Методическое письмо об определении ДДТ, гамма-ГХЦГ, ДДД, альдрина, гептахлора и некоторых других хлорорганических пестицидов в воде, продуктах питания и биологических средах методом хроматографии в тонком слое", утвержденное заместителем Главного санитарного врача СССР в 1968 г.

ПОСТАНОВЛЕНИЕ ЦК КПСС, Совмина СССР от 24.01.1980 n 58 О МЕРАХ ПО УЛУЧШЕНИЮ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ОБЕЗЖИРЕННОГО МОЛОКА, ПАХТЫ И МОЛОЧНОЙ СЫВОРОТКИ  »
Документы СССР »
Читайте также