САНИТАРНО-ПАРАЗИТОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ВОДЫ ХОЗЯЙСТВЕННОГО И ПИТЬЕВОГО ИСПОЛЬЗОВАНИЯ. МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ. МУК 4.2.964-00 (утв. Минздравом РФ 22.03.2000)


Утверждаю
Главный государственный
санитарный врач Российской
Федерации - Первый заместитель
Министра здравоохранения
Российской Федерации
Г.Г.ОНИЩЕНКО
22 марта 2000 года
Дата введения -
1 июня 2000 года
4.2. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. БИОЛОГИЧЕСКИЕ
И МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
САНИТАРНО - ПАРАЗИТОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ВОДЫ
ХОЗЯЙСТВЕННОГО И ПИТЬЕВОГО ИСПОЛЬЗОВАНИЯ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
МУК 4.2.964-00
1. Подготовлены коллективом авторов: Г.И. Новосильцев (к.м.н.), Н.А. Романенко (д.м.н., академик РАЕН), В.А. Рябченко (к.б.н.), Г.С. Горяинова, Т.А. Семенова (к.б.н.), М.Е. Батаева (к.м.н.), Ю.А. Рахманин (д.м.н., академик РАМН), Р.Э. Михайлова (д.м.н.) - ИМПиТМ им. Е.И. Марциновского Минздрава России, НИИКВОВ АКХ им. К.Д. Памфилова, НИИЭЧиГОС им. А.Н. Сысина РАМН. Использованы материалы, разработанные Н.А. Русановой (к.м.н.), Г.Л. Медришем (к.т.н.) - НИИКВОВ АКХ им. К.Д. Памфилова.
2. Утверждены и введены в действие Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации 22 марта 2000 г.
3. С введением настоящих Методических указаний утрачивают силу МУК 4.2.668-97 "Санитарно - паразитологическое исследование воды" и раздел "Контроль качества питьевой воды по паразитологическому показателю (содержание цист лямблий)", пункты 4, 5, 6 Информационно - методического письма "О дополнительных мерах по осуществлению контроля качества питьевой воды по микробиологическим и паразитологическим показателям" от 24 июля 1998 г. N 1100/1670-98-11.
1. Назначение и область применения
1.1. Настоящие Методические указания устанавливают метод лабораторного исследования качества воды хозяйственно - питьевого и культурно - бытового водопользования по паразитологическим показателям безопасности для здоровья человека, проводимого в порядке государственного санитарно - эпидемиологического надзора.
1.2. Методические указания предназначены для применения в лабораториях учреждений, осуществляющих государственный санитарно - эпидемиологический надзор, а также ведомственный лабораторный контроль качества окружающей среды на соответствие:
- СанПиН 2.1.4.559-96 "Питьевая вода. Гигиенические требования к качеству воды централизованных систем питьевого водоснабжения. Контроль качества";
- СанПиН 2.1.2.568-96 "Гигиенические требования к устройству, эксплуатации и качеству воды плавательных бассейнов";
- СанПиН 3.2.563-96 "Профилактика паразитарных болезней на территории Российской Федерации";
- действующим санитарным правилам по охране поверхностных вод от загрязнения.
2. Методика санитарно - паразитологического
исследования воды хозяйственного
и питьевого использования
Методика предназначена для обнаружения в воде цист патогенных простейших кишечника (лямблий, амебы дизентерийной, балантидия) и яиц гельминтов, представляющих непосредственную угрозу для здоровья человека при их заглатывании, при осуществлении контроля качества воды по паразитологическим показателям в источниках хозяйственно - питьевого водоснабжения (поверхностных водоемах, ручьях, каптажах, колодцах, артезианских скважинах), в распределительной сети систем централизованного хозяйственно - питьевого водоснабжения, а также в водоемах рекреационного назначения <*>.
--------------------------------
<*> Настоящая Методика не предназначена для индикации в воде ооцист криптоспоридий, т.к. для их определения требуются более сложная подготовка диагностического материала и использование дорогостоящих специальных тест - систем, не выпускаемых в настоящее время отечественными производителями.
2.1. Принцип методики
Цисты патогенных простейших кишечника и яйца гельминтов обнаруживаются при микроскопическом исследовании осадка, получаемого после центрифугирования не менее 4-кратно разведенного раствора флотанта с плотностью 1,26, в который искомые паразитарные агенты попадают из осадка, смываемого с мембранных фильтров после фильтрации через них исследуемой воды. Осаждение цист простейших и яиц гельминтов происходит за счет резкого снижения плотности флотанта, которая после разведения достигает 1,03 и менее, что ниже плотности паразитарных агентов. Плотность их приводится в разделе 7.
2.2. Чувствительность метода
Метод обладает чувствительностью с пределом обнаружения, равным единичным цистам лямблий на 1 л. Эффективность выделения цист лямблий данным методом зависит от исходной концентрации паразитарных патогенов в пробе, объема пробы, мутности, обилия фитопланктона и квалификации исполнителя.
3. Оборудование и материалы
3.1. Оборудование
3.1.1. Устройство для вакуумной фильтрации через мембранные фильтры: стационарное устройство, используемое для бактериологических и химических исследований в лабораториях водоочистных станций и центров госсанэпиднадзора: фильтровальный аппарат АФ или "Прибор вакуумного фильтрования" ПВФ-142/ЭМ. При отсутствии указанных стационарных установок может быть использован аппарат Гольдмана, состоящий из воронки Гольдмана, колбы для фильтрования под вакуумом номинальной вместимостью 2000 - 5000 мл (ГОСТ 6514-63), водоструйного насоса (ГОСТ 10696-75) или насоса Комовского, а в полевых условиях - ручного велосипедного насоса или других установок, прошедших гигиеническую оценку и имеющих гигиеническое заключение.
3.1.2. Мембранные фильтры с порами размером 3 - 5 мк и диаметром мембранного диска, соответствующим размерам фильтровальной ячейки фильтрующего устройства, - от 35 +/- 2 мм и более. В качестве мембранных фильтров могут быть применены фильтрующие мембраны "Владипор" марки МФАС-СПА ТУ 6-55-221-15-18-98 (предназначены для использования в приборе ПВФ-142/ЭМ), "Миллипор", "Прагопор", "Сарториус" или другие с аналогичными свойствами, прошедшие гигиеническую оценку и имеющие гигиеническое заключение.
3.1.3. Лабораторная центрифуга типа ОПН-3, ОПН-8, ЦЛС-31М со сменным ротором или другие с аналогичными параметрами, обеспечивающие 1500 - 2500 об/мин. (600 - 650 g), позволяющие центрифугировать пробы воды в центрифужных пробирках объемом 10 - 250 мл.
3.1.4. Холодильник электрический или газовый, поддерживающий температуру 4 - 6 град. C.
3.1.5. Термостат электрический типа ТС-80 или аналогичный с автоматическим терморегулятором и термометром с ценой деления 0,2 град. C.
3.1.6. Микроскоп биологический (типа МБИ, "Биолам" и др.), снабженный бинокулярной насадкой (АУ-12 и др.), препаратоводителем (типа СТ-12 и др.), имеющий объективы 10, 20, 40 и объектив 90 - 100x масляной иммерсии, а также желательно объектив 40 - 65x водной иммерсии, обеспечивающий увеличение от 100 до 1000 крат, имеющий объектив и укомплектованный окуляр - микрометром и объект - микрометром для калибровки первого, а также имеющий оптику фазового контраста, расширяющую возможности дифференциации цист от фитопланктона.
3.1.7. Осветитель ОИ-19 для микроскопа или другой аналогичный с мощностью лампы не менее 50 ватт.
3.1.8. Весы лабораторные для взвешивания в диапазоне 50 мг - 200 г равноплечные ручные (аптекарские) с разновесами, ВЛР-200 и др.
3.1.9. Денсиметры (ареометры) типа 1 (А1) с пределами измерения от 1,000 до 1,400 кг/куб. м ГОСТ 1300-74.
3.1.10. Дозаторы пипеточные П1-0,1, П1-0,5, П1-1,0 мл ТУ 64-339-81 или аналогичные.
3.1.11. Пинцет анатомический.
3.1.12. Кисти мягкие из волоса белки, колонка или соболя для живописи N 12 - 18.
3.1.13. Стаканы стеклянные высокие с носиком (ВН) номинальной вместимостью 50 - 100 мл ГОСТ 10394-63.
3.1.14. Пробирки центрифужные градуированные (ПЦГ) емкостью 10 мл ГОСТ 1770-64.
3.1.15. Стекла предметные 25 x 75 мм.
3.1.16. Стекла покровные 18 x 18, 24 x 24 мм ГОСТ 6672-59.
3.1.17. Чашки биологические (Петри) ГОСТ 25336-82.
3.1.18. Часы песочные на 3 - 5 мин. или часы сигнальные.
3.1.19. Штативы лабораторные для пробирок ТУ 64-1-707-80.
3.1.20. Емкости для отбора проб воды из нейтрального материала, пригодные для обеззараживания принятыми методами: канистры пластмассовые емкостью 5 - 10 - 20 - 25 л, стеклянные бутыли, фляги молочные металлические емкостью 30 - 35 л, эмалированные бидоны.
3.1.21. Цилиндры измерительные с носиком 1 - 100, 1 - 250, 1 - 500 ГОСТ 1770-74.
3.1.22. Колба 2-50-2, 2-100-2, 1-1000 ГОСТ 1770-74.
3.1.23. Капельница для многократной дозировки по Манну ГОСТ 9876-61.
3.1.24. Широкогорлые стеклянные или пластиковые флаконы емкостью 100 - 500 мл с притертыми или завинчивающимися крышками.
3.1.25. Спиртовка.
3.1.26. Иглы препаровальные.
3.1.27. Ножницы с прямыми браншами.
3.2. Реактивы
3.2.1. Формальдегид 40%-ный (продажный).
3.2.2. Сульфат цинка семиводный (ZnSO4 x 7H2O) х.ч.
3.2.3. Сахароза ч.д.а.
3.2.4. Сульфат магния (MgSO4) ч.д.а.
3.2.5. Тиосульфат натрия ГОСТ 244-76.
3.2.6. Вода дистиллированная ГОСТ 6709-72.
3.2.7. Натрий хлористый х.ч. ГОСТ 4233-77.
3.2.8. Йод кристаллический х.ч.
3.2.9. Калий йодистый (KI) х.ч.
3.2.10. Эозин сухой х.ч.
3.2.11. Метиленовый синий сухой х.ч.
3.2.12. Кислота хлористоводородная (HCl) 30% х.ч.
3.2.13. Сульфат аммония [(NH4)2SO4] х.ч.
3.2.14. Сульфат железа [Fe2(SO4)3] х.ч.
3.2.15. Сульфат меди (CuSO4) х.ч.
3.2.16. Панкреатин сухой.
3.2.17. Сода двууглекислая (Na2CO3).
3.3. Приготовление рабочих растворов реактивов
3.3.1. Флотанты - любой из трех ниже названных:
- 33%-ный водный раствор семиводного сульфата цинка: 331 г семиводного сульфата цинка растворяют в 1 куб. дм кипящей дистиллированной воды;
- 30%-ный водный раствор сахарозы: 300 г сахарозы ч.д.а. растворяют в 1 куб. дм горячей (70 - 80 град. C) дистиллированной воды;
- раствор, состоящий из смеси насыщенных растворов сульфата магния (250 г соли растворяют в 1 л воды при температуре 80 град. C), тиосульфата натрия (300 г соли растворяют в 1 л кипящей воды) и дистиллированной воды, соотношение компонентов 3:3:1.
После приготовления флотанта и снижения его температуры до 18 град. C контролируют его удельную плотность ареометром. Для выделения цист простейших и яиц гельминтов, представляющих непосредственную опасность заражения человека при заглатывании с водой, удельная плотность флотанта должна быть 1,25 - 1,26. Если величина этого показателя ниже, ее нужно откорректировать, добавляя более концентрированные растворы соответствующих веществ.
3.3.2. 3%-ный раствор Люголя: 1,5 г йода кристаллического и 3 г калия йодистого растворяют в 100 мл дистиллированной воды (первым растворяют калий йодистый), выдерживают в темноте при 37 град. C в течение 3 суток, после чего используют в работе.
3.3.3. 2%-ный водный раствор формалина: 1 часть 40%-ного формальдегида растворяют в 20 частях дистиллированной воды.
3.3.4. Жидкость Барбагалло: 3%-ный формалин на физиологическом растворе (0,85% хлорида натрия).
3.3.5. 1%-ный водный раствор эозина.
3.3.6. Раствор, состоящий из 1 части метиленового синего и 50000 частей дистиллированной воды, готовят путем последовательных разведений.
3.3.7.Смесь (искусственный дуоденальный сок), состоящая из 0,5 г панкреатина, 0,9 г двууглекислой соды и 5 мл дистиллированной воды.
3.3.8. Раствор хлористоводородной кислоты 1%-ный.
4. Отбор и хранение проб
Отбор проб питьевой воды и воды плавательных бассейнов по количеству и кратности проводят в соответствии с СанПиН 2.1.4.559-96 "Питьевая вода. Гигиенические требования к качеству воды централизованных систем питьевого водоснабжения. Контроль качества" и СанПиН 2.1.2.568-96 "Гигиенические требования к устройству, эксплуатации и качеству воды плавательных бассейнов".
Контроль воды подземных водоисточников по паразитологическим показателям может быть рекомендован при условии неоднократных неудовлетворительных микробиологических результатов исследования.
Количество проб и точек забора в распределительной сети утверждается по согласованию с санитарно - эпидемиологической службой при разработке рабочей программы с учетом численности водопотребителей.
Отбор проб воды производится в чистые емкости. Сосуды больших объемов - молочные фляги, металлические и пластмассовые ведра и т.п., которые тщательно промываются кипяченой водой и ополаскиваются отбираемой для анализа водой.
Пробы воды могут доставляться в лабораторию без обработки или, в целях облегчения их транспортирования, после предварительной обработки (концентрирования материала путем фильтрования на месте отбора проб, в лаборатории водопроводной станции и др.).
С этой же целью может быть использована методика первичной концентрации паразитарных патогенов с помощью таких коагулянтов, как сульфат аммония, сульфат железа, сульфат меди в дозе 0,1 - 0,3 г/л.
В пробу воды на месте отбора добавляют коагулянт, затем тщательно перемешивают и отстаивают 1 - 2 ч. После этого надосадочную жидкость удаляют, а осадок переносят в сосуд объемом 1 л и доставляют в лабораторию. Содержимое сосуда вновь отстаивают 1 - 2 ч, а осадок после удаления надосадочной жидкости переносят в центрифужные пробирки 10 - 50 мл (в зависимости от объема осадка) и центрифугируют в течение 5 мин. при 1500 об/мин. Надосадочную жидкость сливают, а к осадку добавляют 3 мл 1%-ного раствора хлористоводородной кислоты для растворения хлопьев коагулянта, перемешивают и центрифугируют в таком же режиме. Надосадочную жидкость удаляют, а осадок обрабатывают по нижеописанной методике.
Пробы, не прошедшие предварительную обработку, могут храниться при температуре 15 - 20 град. C не более двух суток.
В случае если первичная обработка пробы воды (фильтрование) проводилась вне лаборатории, использованные фильтры помещают в широкогорлый флакон или стеклянную банку, добавляют 30 - 50 мл исходной воды; закрывают флакон или банку завинчивающейся или притертой крышкой, маркируют, указывают дату, место отбора, количество профильтрованной воды и транспортируют в лабораторию для дальнейшего исследования. При невозможности исследования в день отбора материал хранят при 4 град. C не более суток; при отсутствии необходимости определения жизнеспособности цист кишечных простейших и яиц гельминтов материал хранят при 4 град. C не более 3 - 4 суток после добавления в него формальдегида с таким расчетом, чтобы концентрация его в суспензии составила 2%.
5. Ход исследования
Перед началом фильтрации мембранные фильтры должны быть подвергнуты 10-минутному кипячению в дистиллированной воде для удаления посторонних частиц из пор фильтров, препятствующих оптимальному проведению процесса фильтрации.
Питьевая вода исследуется в объеме не менее 50 л, вода водоисточников - в объеме не менее 25 л.
Исследуемый объем воды с помощью фильтровального устройства

КОНТРОЛЬ ЭФФЕКТИВНЫХ ДОЗ ОБЛУЧЕНИЯ ПАЦИЕНТОВ ПРИ МЕДИЦИНСКИХ РЕНТГЕНОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЯХ. МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО МЕТОДАМ КОНТРОЛЯ. МУК 2.6.1.962-00 (утв. Минздравом РФ 22.03.2000)  »
Постановления и Указы »
Читайте также