МЕТОДЫ САНИТАРНО-ПАРАЗИТОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ. МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ. МУК 4.2.796-99 (утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 22.12.1999)


Утверждаю
Первый заместитель
Министра здравоохранения
Российской Федерации,
Главный государственный
санитарный врач
Российской Федерации
Г.Г.ОНИЩЕНКО
22 декабря 1999 года
Дата введения -
22 марта 2000 года
4.2. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. БИОЛОГИЧЕСКИЕ
И МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
МЕТОДЫ САНИТАРНО-ПАРАЗИТОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
МУК 4.2.796-99
1. Подготовлены авторским коллективом в составе: д.м.н. Романенко Н.А., к.б.н. Семенова Т.А., к.м.н. Новосильцев Г.И., Мусыргалина Ф.Ф., Сабгайда Т.П., Байрамгулова Г.Р. (ИМПиТМ им. Е.И. Марциновского МЗ РФ), д.б.н. Беэр С.А. (Институт паразитологии РАН), к.м.н. Хроменкова Е.П., к.м.н. Демидова Л.Л., к.м.н. Гримайло Л.В. (Ростовский НИИ гигиены и паразитологии), к.б.н. Чернышова Л.Г. (ХабНИИЭМ), д.б.н. Скрипова Л.В. (БелНИИЭМ), к.б.н. Козырева Т.Г. (ЦГСЭН в Хабаровском крае), Тимошенко Н.И., Гороненкова О.Н., Кузнецова К.Ю., Пирожкова А.А. (ЦГСЭН г. Москвы), д.м.н. Чебышев Н.В., к.б.н. Черникова Е.А., к.б.н. Макарова Т.Ю. (ММА им. И.М. Сеченова), к.м.н. Евдокимов В.И., к.м.н. Землянский О.А., Евдокимов В.В., Феттер В.В. (ЦГСЭН в Белгородской области), Сыскова Т.Г., к.б.н. Цыбина Т.Н. (ФЦ ГСЭН РФ), к.м.н. Гузеева Т.М. (ЦГСЭН в Нижневартовском районе), д.в.н. Черепанов А.А., Григорьев А.Г., Пирова Л.А., д.б.н. Горохов В.В., Воличев А.Н. (ВИГИС), д.м.н. Локтева И.М., д.м.н. Падченко И.К., Павликовская Т.Н., Кладова Л.А., Гораш В.Р. (НИИЭиИБ им. Л.В. Громашевского).
2. Утверждены Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации 22 декабря 1999 года. Введены в действие 22 марта 2000 года.
3. Введены взамен "Методических указаний по гельминтологическому исследованию объектов внешней среды и санитарным мероприятиям по охране от загрязнения яйцами гельминтов и обезвреживанию от них нечистот, почвы, овощей, ягод, предметов обихода" 1440-76 от 14 июня 1976 г.
1. Назначение и область применения
1.1. Настоящие Методические указания устанавливают методы лабораторного контроля за объектами окружающей среды (почва, сточные воды, их осадки, навоз и навозные стоки, предметы обихода, природная и питьевая вода и т.п.), санитарным состоянием коммунальных, сельскохозяйственных, пищевых, торговых предприятий, детских школьных, дошкольных и других учреждений, а также для проведения сертификационных испытаний приборов, установок отечественного и импортного производства (например, биотуалеты, водоочистные устройства индивидуального и коллективного пользования и др.) по паразитологическим показателям.
1.2. Методические указания предназначены для применения в аккредитованных паразитологических производственных, испытательных лабораториях и лабораториях учреждений Государственной санитарно-эпидемиологической службы Российской Федерации, осуществляющих санитарно-паразитологический контроль качества окружающей среды на соответствие СанПиН 3.2.569-96 "Профилактика паразитарных болезней на территории Российской Федерации", а также научных учреждений, занимающихся изучением особенностей эпидемиологии паразитарных болезней и научно обосновывающих мероприятиях по охране окружающей среды от загрязнения и защите здоровья населения.
2. Нормативные ссылки
2.1. Федеральный закон "О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения" от 30 марта 1999 г. N 52-ФЗ.
2.2. Положение о государственном санитарно-эпидемиологическом нормировании, утвержденное Постановлением Правительства Российской Федерации от 5 июня 1994 г. N 625, с изменениями и дополнениями к нему, утвержденными Постановлением Правительства Российской Федерации от 30 июня 1998 г. N 680.
2.3. Положение о государственной санитарно-эпидемиологической службе Российской Федерации, утвержденное Постановлением Правительства Российской Федерации от 30 июня 1998 г. N 680.
2.4. СанПиН 3.2.569-96 "Профилактика паразитарных болезней на территории Российской Федерации".
3. Санитарно-паразитологический контроль
за объектами окружающей среды
Выбор эпидемически значимых факторов окружающей среды при проведении лабораторного санитарно-паразитологического надзора за объектами хозяйственно-бытовой и производственной деятельности человека в каждом конкретном случае проводит врач-паразитолог, а при его отсутствии - врач-эпидемиолог совместно с санитарными врачами ЦГСЭН.
Исследуемый материал, объемы и кратность отбираемых врачом-лаборантом или лаборантом проб на контролируемых объектах представлен в табл. 1.
По эпидемической значимости объекты хозяйственно-бытовой и производственной деятельности человека делятся на 3 категории:
1. Предприятия общественного питания, пищеблоки в детских дошкольных учреждениях (ДДУ), школах, больницах, домах инвалидов, престарелых, детских домах и домах ребенка, сооружения питьевого водоснабжения населения и др. (в табл. 1 отмечены знаком ++).
На данных объектах нарушение санитарно-эпидемиологического режима непроизвольно приведет к заражению человека (через пищу, воду и т.п.) возбудителями гельминтозов и (или) кишечных протозоозов, поэтому санитарно-паразитологический надзор за ними должен быть наиболее тщательным и строгим.
2. Теплицы, рыборазводные хозяйства, предприятия торговли и др. (в табл. 1 помечены знаком +) не менее опасны в эпидемическом отношении, но при строгом соблюдении правил личной и общей гигиены, технологических приемов (мытье рук, овощей, фруктов, столовой зелени, термическая обработка рыбы, мяса и т.д.) можно резко снизить или исключить риск заражения возбудителями паразитарных болезней. Лабораторный контроль за соблюдением санитарно-эпидемиологического режима на объектах 2 категории должен быть не менее строгим, чем на объектах 1 категории.
3. Поля орошения, очистные сооружения канализации и др. объекты (в таблице 1 - без пометки) с меньшим риском заражения человека должны также подвергаться лабораторному санитарно-паразитологическому надзору даже при строгом соблюдении на них санитарного режима и правил личной гигиены.
В каждой категории указанных объектов имеются предметы (среда), которые в обязательном порядке должны исследоваться на наличие яиц гельминтов и цист кишечных патогенных простейших. Обнаружение на (в) них возбудителей паразитарных болезней объективно свидетельствует о нарушении санитарно-эпидемиологического режима (табл. 1, графа 3).
Таблица 1
САНИТАРНО-ПАРАЗИТОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
НА ОБЪЕКТАХ ХОЗЯЙСТВЕННО-БЫТОВОЙ И ПРОИЗВОДСТВЕННОЙ
ДЕЯТЕЛЬНОСТИ ЧЕЛОВЕКА
----T-------------------T--------------------T-----------T-------¬
¦ N ¦ Объекты надзора ¦Исследуемый материал¦Кратность ¦Число ¦
¦п/п¦ ¦и места отбора проб ¦исследо- ¦отби- ¦
¦ ¦ ¦ ¦ваний ¦раемых ¦
¦ ¦ ¦ ¦ ¦проб ¦
+---+-------------------+--------------------+-----------+-------+
¦ 1 ¦ 2 ¦ 3 ¦ 4 ¦ 5 ¦
+---+-------------------+--------------------+-----------+-------+
¦1 ¦Пищеблоки ++ ДЦУ, ¦Смывы с разделочных ¦2 раза ¦20 - 30¦
¦ ¦школ, школ-интерна-¦столов, досок, рук ¦в год ¦ ¦
¦ ¦тов, детских домов,¦персонала, ручек ¦ ¦ ¦
¦ ¦домов и баз отдыха,¦дверей, посуды, ¦ ¦ ¦
¦ ¦санаториев, летних ¦ложек, вилок, ножей,¦ ¦ ¦
¦ ¦оздоровительных ¦овощей, фруктов, ¦ ¦ ¦
¦ ¦учреждений, кафе, ¦ягод, столовой зеле-¦ ¦ ¦
¦ ¦ресторанов, столо- ¦ни, кранов и бачков ¦ ¦ ¦
¦ ¦вых, лечебных ¦для питьевой воды ¦ ¦ ¦
¦ ¦учреждений ¦ ¦ ¦ ¦
+---+-------------------+--------------------+-----------+-------+
¦2 ¦Залы для приема ¦Смывы с клеенок, ¦2 раза ¦20 - 30¦
¦ ¦пищи ++ в тех же ¦скатертей обеденных ¦в год ¦ ¦
¦ ¦учреждениях ¦столов, посуды, рук ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦официантов, полоте- ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦нец ¦ ¦ ¦
+---+-------------------+--------------------+-----------+-------+
¦3 ¦Мясокомбинаты ++ ¦Смывы со столов для ¦2 раза ¦20 - 30¦
¦ ¦ ¦готовой продукции, ¦в год ¦ ¦
¦ ¦ ¦рук персонала, спец-¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦одежды, рабочего ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦инвентаря ¦ ¦ ¦
+---+-------------------+--------------------+-----------+-------+
¦4 ¦Предприятия торгов-¦Смывы с прилавков, ¦2 раза ¦20 - 30¦
¦ ¦ли пищевыми продук-¦стеллажей, рук про- ¦в год ¦ ¦
¦ ¦тами ++ ¦давцов, весов, сто- ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦лов в комнатах прие-¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ма пищи, водопровод-¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ных кранов или кра- ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦нов бачков для хра- ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦нения питьевой воды,¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦спецодежды ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦Овощи, фрукты, яго- ¦2 раза ¦2 ¦
¦ ¦ ¦ды, столовая зелень ¦в год ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦По эпид. ¦2 ¦
¦ ¦ ¦ ¦показаниям,¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦и до реали-¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦зации насе-¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦лению ¦ ¦
+---+-------------------+--------------------+-----------+-------+
¦5 ¦Очистные станции ¦Вода на входе на ¦В соответ- ¦2 ¦
¦ ¦централизованных ¦станцию и выходе из ¦ствии с ¦ ¦
¦ ¦систем питьевого ¦распределительной ¦информа- ¦ ¦
¦ ¦водоснабжения ++ ¦сети ¦ционно-ме- ¦ ¦
¦ ¦ ¦Вода из водовозок ¦тодическим ¦2 ¦
¦ ¦ ¦ ¦письмом по ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦контролю ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦качества ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦питьевой ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦воды N ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦1100/1670- ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦98-111 ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦от 24.07.98¦ ¦
+---+-------------------+--------------------+-----------+-------+
¦6 ¦Тепличные хозяйст- ¦Почва с поверхности ¦Вновь заво-¦2 - 3 ¦
¦ ¦ва + ¦и глубины до 20 см ¦зимая, пос-¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦ле внесения¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦органиче- ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦ских удоб- ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦рений, ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦остальная -¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦1 раз в год¦ ¦
¦ ¦ ¦Вода, используемая ¦Во время ¦2 - 3 ¦
¦ ¦ ¦для поливов выращи- ¦поливов ¦ ¦
¦ ¦ ¦ваемых культур ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦Овощи, столовая ¦2 раза: ¦2 - 3 ¦
¦ ¦ ¦зелень ¦в период ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦выращивания¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦и сбора ¦ ¦
¦ ¦ ¦ ¦урожая ¦ ¦
¦ ¦ ¦Смывы с рук и спец- ¦2 раза ¦20 - 30¦
¦ ¦ ¦одежды персонала, ¦в год ¦ ¦
¦ ¦ ¦столов в комнате для¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦приема пищи ¦ ¦ ¦
+---+-------------------+--------------------+-----------+-------+
¦7 ¦Оросительные систе-¦Почва с поверхности ¦2 раза ¦2 - 3 ¦
¦ ¦мы с использованием¦и глубины до 20 см, ¦в год ¦ ¦
¦ ¦сточных вод, их ¦до и после внесения ¦ ¦ ¦
¦ ¦осадков, животно- ¦жидких и твердых ¦ ¦ ¦
¦ ¦водческих стоков + ¦органических удоб- ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦рений ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦Сточные воды, их ¦2 раза ¦ 2 - 3 ¦
¦ ¦ ¦осадки, животновод- ¦в год ¦ ¦
¦ ¦ ¦ческие стоки, ис- ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦пользуемые в качест-¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ве удобрений ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦Многолетние или од- ¦2 раза ¦ 2 - 3 ¦
¦ ¦ ¦нолетние травы, тех-¦в год ¦ ¦
¦ ¦ ¦нические и кормовые ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦культуры ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦Грунтовые воды по ¦2 раза ¦ 2 - 3 ¦
¦ ¦ ¦ходу грунтового ¦в год ¦ ¦
¦ ¦ ¦потока: на уровне ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦выше и ниже (500 м) ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦полей орошения ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦Смывы с рук и спец- ¦2 раза ¦20 - 30¦
¦ ¦ ¦одежды персонала, ¦в год ¦ ¦
¦ ¦ ¦мебели в комнатах ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦отдыха и приема пищи¦ ¦ ¦
+---+-------------------+--------------------+-----------+-------+
¦8 ¦Очистные сооружения¦Сточная вода на вхо-¦2 раза ¦2 - 3 ¦
¦ ¦канализации +: ¦де и выходе из ¦в год ¦ ¦
¦ ¦сооружения механи- ¦очистных сооружений ¦ ¦ ¦
¦ ¦ческой очистки, ¦Вода из поверхност- ¦2 раза ¦2 - 3 ¦
¦ ¦аэро- и биостанции,¦ных водоемов: в мес-¦в год ¦ ¦
¦ ¦малогабаритные ¦тах сброса сточных ¦ ¦ ¦
¦ ¦(компактные) очист-¦вод, выше и ниже них¦ ¦ ¦
¦ ¦ные сооружения, ¦(500 м) ¦ ¦ ¦
¦ ¦биологические пруды¦Осадки сточных вод ¦2 раза ¦2 - 3 ¦
¦ ¦и др. ¦из первичных и вто- ¦в год ¦ ¦
¦ ¦ ¦ричных отстойников, ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦с иловых площадок, ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦после обеззаражива- ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ния ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦Смывы с рук и спец- ¦2 раза ¦20 - 30¦
¦ ¦ ¦одежды персонала, ¦в год ¦ ¦
¦ ¦ ¦мебели в комнатах ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦отдыха и приема пищи¦ ¦ ¦
+---+-------------------+--------------------+-----------+-------+
¦9 ¦Животноводческие ¦Смывы с мебели ком- ¦1 раз в год¦20 - 30¦
¦ ¦хозяйства + ¦нат отдыха и приема ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦пищи, рук и спец- ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦одежды персонала, ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦дверных ручек, под- ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦собных помещений ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦Животноводческие ¦1 раз в год¦2 - 3 ¦
¦ ¦ ¦стоки на входе и ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦выходе из очистных ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦сооружений ¦ ¦ ¦
+---+-------------------+--------------------+-----------+-------+
¦10 ¦Бани, плавательные ¦Вода. В банях - хо- ¦1 раз ¦2 - 3 ¦
¦ ¦бассейны + ¦лодная вода, в бас- ¦в квартал ¦ ¦
¦ ¦ ¦сейнах - вода из ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ванн ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦Смывы с рук и спец- ¦1 раз ¦20 - 30¦
¦ ¦ ¦одежды персонала, ¦в квартал ¦ ¦
¦ ¦ ¦скамеек в раздевал- ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ках, столов, кресел,¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦обходных дорожек, ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦дверных ручек и ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦поручней ¦ ¦ ¦
+---+-------------------+--------------------+-----------+-------+
¦11 ¦Детские учрежде- ¦Смывы с рук детей и ¦2 раза ¦20 - 30¦
¦ ¦ния +: ДДУ, школы, ¦персонала, спецодеж-¦в год ¦ ¦
¦ ¦школы-интернаты, ¦ды, постельного и ¦ ¦ ¦
¦ ¦детские дома, ¦нательного белья, ¦ ¦ ¦
¦ ¦детские отделения ¦игрушек, парт, сто- ¦ ¦ ¦
¦ ¦больниц, летние ¦лов, учебных принад-¦ ¦ ¦
¦ ¦оздоровительные и ¦лежностей, спортив- ¦ ¦ ¦
¦ ¦спортивные лагеря ¦ного инвентаря, ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ручек дверей спален,¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦палат, игровых и ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦туалетных комнат, ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦водопроводных кра- ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦нов, стульчаков, ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦скамеек ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦Почва с поверхности ¦2 раза ¦2 - 3 ¦
¦ ¦ ¦игровых площадок, у ¦в год ¦ ¦
¦ ¦ ¦входа и вокруг поме-¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦щений, вдоль забо- ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ров, около веранд, ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦вокруг наружных сан-¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦узлов, школьных ого-¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦родов ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦Песок в песочницах ¦2 раза ¦1 - 2 ¦
¦ ¦ ¦ ¦в год ¦ ¦
+---+-------------------+--------------------+-----------+-------+
¦12 ¦Детские игровые ¦Почва с поверхности ¦1 раз в год¦2 - 3 ¦
¦ ¦площадки + в пар- ¦Песок ¦1 раз в год¦1 - 2 ¦
¦ ¦ках, скверах, во ¦Смывы со скамеек, ¦1 раз в год¦20 - 30¦
¦ ¦дворах коммунальных¦горок, качелей, бре-¦ ¦ ¦
¦ ¦домовладений и т.п.¦вен, лестничной ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦стенки, ручек игро- ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦вых принадлежностей ¦ ¦ ¦
+---+-------------------+--------------------+-----------+-------+
¦13 ¦Дома для инвалидов ¦Смывы в палатах, ¦2 раза ¦20 - 30¦
¦ ¦и престарелых ¦туалетных комнатах, ¦в год ¦ ¦
¦ ¦ ¦пищеблоках, с рук ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦персонала ¦ ¦ ¦
+---+-------------------+--------------------+-----------+-------+
¦14 ¦Детские приемни- ¦Смывы в палатах, ¦2 раза ¦20 - 30¦
¦ ¦ки-распределители ¦учебных и игровых ¦в год ¦ ¦
¦ ¦ ¦комнатах, туалетах, ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦пищеблоках, с рук ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦персонала ¦ ¦ ¦
+---+-------------------+--------------------+-----------+-------+
¦15 ¦Исправительно-тру- ¦Смывы в камерах, в ¦2 раза ¦20 - 30¦
¦ ¦довые учреждения ¦помещениях трудовой ¦в год ¦ ¦
¦ ¦ ¦деятельности, ком- ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦натах отдыха, туале-¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦тах, пищеблоках, с ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦рук персонала ¦ ¦ ¦
+---+-------------------+--------------------+-----------+-------+
¦16 ¦Транспорт: ¦Смывы с рук и спец- ¦1 раз в год¦20 - 30¦
¦ ¦железнодорожный, ¦одежды проводников, ¦ ¦ ¦
¦ ¦водный, воздушный и¦бортпроводниц, ¦ ¦ ¦
¦ ¦автотранспорт ¦кресел, постельных ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦принадлежностей, ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ручек дверей ¦ ¦ ¦
+---+-------------------+--------------------+-----------+-------+
¦17 ¦Мастерские по вы- ¦Смывы с рук и спец- ¦1 раз в год¦20 - 30¦
¦ ¦делке шкур и ателье¦одежды персонала, ¦ ¦ ¦
¦ ¦по пошиву меховых ¦шкур, меховых изде- ¦ ¦ ¦
¦ ¦изделий ¦лий, разделочного ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦инвентаря, мебели в ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦комнатах отдыха и ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦приема пищи ¦ ¦ ¦
+---+-------------------+--------------------+-----------+-------+
¦18 ¦Территория населен-¦Почва с территории ¦1 раз в год¦8 - 10 ¦
¦ ¦ных пунктов ¦улиц, дворов индиви-¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦дуальных, фермерских¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦и коммунальных домо-¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦владений, вокруг ма-¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦газинов, с площадок ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦для выгула собак, ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦спортивных сооруже- ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦ний, рекреационных ¦ ¦ ¦
¦ ¦ ¦зон ¦ ¦ ¦
+---+-------------------+--------------------+-----------+-------+
¦19 ¦Территории, отво- ¦Почва ¦Во время ¦10 - 15¦
¦ ¦димые под строи- ¦ ¦отвода ¦ ¦
¦ ¦тельство объектов ¦ ¦участков ¦ ¦
¦ ¦пищевого, культур- ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦ного, спортивного ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦назначения (баз, ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦складов, магазинов,¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦скверов, детских ¦ ¦ ¦ ¦
¦ ¦площадок) ¦ ¦ ¦ ¦
L---+-------------------+--------------------+-----------+--------
4. Оценка результатов
санитарно-паразитологических исследований
При проведении санитарно-паразитологических исследований масса объединенной пробы почвы должна составлять 200 г; донных отложений - 200 г; питьевой воды - 50 л; природной воды - 25 л; поверхностных стоков - 1 л; неочищенных (до поступления на очистные сооружения) сточных вод или животноводческих стоков - 1 л; после сооружений механической очистки - 3 л; после вторичных отстойников, биологических прудов, полей фильтрации - 10 л; осадков сточных вод 98% влажности - 1 л; обезвоженных осадков сточных вод и навоза - 200 г.
Смывы на пробу берут с площади 0,25 кв. м (0,5 х 0,5 м) или с 10 тарелок, кукол, ручек дверей.
Отбор пробы пыли пылесосом проводится с поверхности площадью 0,25 кв. м, время отбора 20 сек.
В заключении о санитарном состоянии объекта указывают общее количество исследованных проб, число положительных из них и число обнаруженных яиц гельминтов и цист кишечных патогенных простейших по видам.
Количество жизнеспособных возбудителей паразитарных болезней определяют при просмотре их значительного (не менее 100) числа, а затем вычисляют удельный вес; если найдены единичные яйца гельминтов и цисты кишечных патогенных простейших, приводят их абсолютные числа.
Результаты анализа вносят в "Журнал регистрации санитарно-паразитологических исследований" (форма 373"у"), в котором отражают место отбора, даты отбора и исследования проб, метод исследования, количество исследуемого материала (в граммах или литрах), результаты (всего обнаружено возбудителей паразитозов, в т.ч. яиц гельминтов, цист кишечных патогенных простейших), в среднем на 1 кг/л или 1 кв. дм площади.
О санитарно-гигиеническом состоянии объектов окружающей среды судят по наличию или отсутствию на (в) них возбудителей паразитарных болезней.
В соответствии с СанПиНом 3.2.569-96 "Профилактика паразитарных болезней на территории Российской Федерации" вода питьевая, рекреационные воды, почва селитебных территорий, населенных пунктов, сельскохозяйственных полей, фермерских, крестьянских, а также тепличных хозяйств, сточные воды, их осадки и животноводческие стоки, сбрасываемые в поверхностные водоемы, не должны содержать жизнеспособных яиц гельминтов и цист кишечных патогенных простейших.
Возбудители паразитарных болезней не должны обнаруживаться на ночных горшках, детских полотенцах, игрушках, посуде, клеенках на столах, руках детей и персонала, разделочном инвентаре пищеблоков, ручках дверей, нательном и постельном белье. Обнаружение даже единичных яиц гельминтов и цист кишечных патогенных простейших на указанных предметах свидетельствует о нарушении санитарно-эпидемиологического режима в обследуемых объектах.
5. Оборудование
для санитарно-паразитологических лабораторий
5.1. Аппаратура, инструментарий, оптика
5.1.1. Шкаф вытяжной.
5.1.2. Холодильник электрический бытовой.
5.1.3. Термостат электрический (ТС-80 или аналогичный).
5.1.4. Центрифуги напольные (типа ОПН-3, ОПН-8, ЦЛС-31М со сменным ротором).
5.1.5. Микроскоп "БИОЛАМ" или "БИМАМ", микроскоп стереоскопический (типа МБС).
5.1.6. Осветитель к микроскопу ОИ-19 или другой аналогичный.
5.1.7. Столик нагревательный к микроскопу.
5.1.8. Весы лабораторные общего назначения 4-го класса точности, максимальный предел взвешивания 200 г.
5.1.9. Весы лабораторные общего назначения 4-го класса точности, максимальный предел взвешивания 1 кг.
5.1.10. Пинцеты анатомические.
5.1.11. Кисти мягкие (из волоса белки, колонка или соболя) для живописи N 12 - 18.
5.1.12. Штативы лабораторные для пробирок (ТУ 61-1-707-80).
5.1.13. Иглы препаровальные.
5.1.14. Совки, шпатели, ложки, лопаты, бур Некрасова.
5.1.15. Пластиковые мешки и пакеты.
5.1.16. Щюттель-аппарат.
5.1.17. Аппарат Гольдмана.
5.1.18. Насос Камовского, водоструйный насос.
5.1.19. Приборы вакуумного фильтрования ПВФ-142/Э и ПВФ-142/ЭМ.
5.1.20. Мембранные фильтры с размером пор 1 - 4 мкм и диаметром мембранного диска, соответствующим размерам фильтродержателя фильтровального устройства (фирм "Владипор", "Сарториус", "Миллипор", "Прагопор").
5.1.21. Пылесос, электрощетка.
5.1.22. Ситечки с металлической или капроновой сеткой (размер ячеек 0,25 - 0,3 мм).
5.1.23. Резиновые груши разных размеров.
5.1.24. Скальпели анатомические.
5.1.25. Ножницы анатомические разных размеров.
5.1.26. Счетная камера (для количественного учета яиц гельминтов).
5.1.27. Карандаш по стеклу.
5.1.28. Лейкопластырь.
5.1.29. Скотч.
5.1.30. Клеенка.
5.1.31. Фартук клеенчатый.
5.1.32. Перчатки резиновые.
5.1.33. Весы для уравновешивания центрифужных пробирок.
5.1.34. Кюветы эмалированные.
5.1.35. Кюветы почкообразные.
5.1.36. Корнцанги.
5.1.37. Пинцеты глазные.
5.1.38. Штатив Бунзена.
5.1.39. Треножник.
5.1.40. Горелки газовые.
5.1.41. Трубки резиновые.
5.1.42. Сложная петля.
5.1.43. Поплин, перкаль, сатин.
5.1.44. Лопаты.
5.1.45. Ножи почвенные.
5.1.46. Сита почвенные с сеткой 0,25; 0,5; 1; 3 мм.
5.1.47. Шпатели металлические.
5.1.48. Шпатели пластмассовые.
5.1.49. Калька.
5.1.50. Пергамент.
5.1.51. Коробки картонные.
5.1.52. Аппарат Бермана.
5.1.53. Термовлагобарометр БМ-2.
5.2. Стеклоизделия
5.2.1. Стаканы стеклянные высокие с носиком (ВН) номинальной вместимостью 50 - 100 мл (ГОСТ 10394-63).
5.2.2. Пробирки центрифужные градуированные (ПЦГ) емкостью 10 мл (ГОСТ 1770-64), 50, 100 и 250 мл.
5.2.3. Стекла предметные размерами 25 х 75 мм; 60 х 120 мм.
5.2.4. Стекла покровные размерами 18 х 18; 24 х 24 мм (ГОСТ 6672-99).
5.2.5. Чашки биологические (Петри) (ГОСТ 25336-82).
5.2.6. Часы песочные на 3 - 5 мин. или часы сигнальные.
5.2.7. Емкости для отбора проб воды, осадков, навоза и навозных стоков из нейтрального материала, пригодные для обеззараживания принятыми методами: канистры пластмассовые емкостью 1; 2; 5; 20 и 25 л; стеклянные бутылки; фляги металлические емкостью 30 - 35 л; эмалированные бидоны; ведра 8 - 10 л; тазы.
5.2.8. Цилиндры измерительные с носиком 1-00, 1-25, 1-500 (ГОСТ 1770-74).
5.2.9. Колбы 2-50-2, 2-100-2, 1-1000 (ГОСТ 1770-74).
5.2.10. Капельница для многократной дозировки по Манну (ГОСТ 9876-61).
5.2.11. Широкогорлые стеклянные или пластиковые флаконы емкостью 100; 500; 1000; 2000 мл с притертыми или завинчивающимися крышками.
5.2.12. Спиртовки лабораторные стеклянные.
5.2.13. Денсиметры (ареометры типа I (А1) с пределами измерения от 1,000 до 1,600 кг/куб. м (ГОСТ 1300-74).
5.2.14. Дозаторы пипеточные П1-0,1; П1-0,5; П1-1,0 мл (ТУ 64-339-81).
5.2.15. Цилиндры градуированные с носиком на 1,5 - 2,0 л.
5.2.16. Стеклянные воронки разных размеров.
5.2.17. Часовые стекла разных размеров.
5.2.18. Стеклянные палочки.
5.2.19. Пипетки градуированные от 1 до 10 мл.
5.2.20. Банки стеклянные с притертыми или резиновыми пробками разных размеров до 500 мл.
5.2.21. Банки стеклянные широкогорлые до 2 л.
5.2.22. Банки фарфоровые без крышек 500 мл.
5.2.23. Бутыли (1 - 5 л) с тубусом для дезинфицирующих растворов.
5.2.24. Пробирки химические.
5.2.25. Кружки фарфоровые с ручками разных размеров.
5.2.26. Ступки и пестики фарфоровые разных размеров.
5.2.27. Мензурки на 100; 250; 500; 1000 мл.
5.2.28. Кристаллизаторы стеклянные.
5.3. Реактивы
5.3.1. Натрий едкий (ГОСТ 4328-66).
5.3.2. Нитрат натрия, ч.д.а.
5.3.3. Нитрат аммония или гранулированная селитра (аммиачная).
5.3.4. Хлорид цинка.
5.3.5. Нитрат свинца.
5.3.6. Формальдегид 40%-ный.
5.3.7. Нитрат калия (калиевая селитра).
5.3.8. Кислота соляная с массовой долей 3%.
5.3.9. Масло касторовое.
5.3.10. Сульфат железа.
5.3.11. Сульфат меди.
5.3.12. Спирт этиловый ректифицированный технический.
5.3.13. Сульфат цинка семиводный (ZnSO4 х 7Н2О), х.ч.
5.3.14. Сахароза, ч.д.а.
5.3.15. Сульфат магния (MgSO4), ч.д.а.
5.3.16. Тиосульфат натрия.
5.3.17. Вода дистиллированная.
5.3.18. Натрий хлористый, х.ч. на изотоническом растворе с массовой долей 0,85% (жидкость Барбагалло).
5.3.19. Йод кристаллический, х.ч.
5.3.20. Калий йодистый (KJ), х.ч.
5.3.21. Эозин сухой, х.ч.
5.3.22. Метиленовый синий сухой, х.ч.
5.3.23. Кислота молочная, х.ч.
5.3.24. Панкреатин.
5.3.25. Пепсин (возможен искусственный).
5.3.26. Трипсин.
5.3.27. Натрий двууглекислый, ч.д.а.
5.3.28. Сульфат алюминия.
5.3.29. Хлорное железо.
5.3.30. Хлористоводородная кислота.
5.3.31. Глицерин.
5.3.32. Раствор Люголя.
5.3.33. Эфир.
5.3.34. Ацетон.
5.3.35. Бензол.
5.3.36. Ксилол.
5.3.37. Бриллианткрезилблау синий (1:10000).
5.3.38. Известь хлорная.
5.3.39. Серная кислота.
5.3.40. Калий двуххромовокислый.
5.3.41. Иммерсионное масло.
5.3.42. Хромпик.
5.3.43. Метиленовый синий.
5.3.44. Молочная кислота.
5.3.45. Раствор йода спиртовой 5%-ный.
5.3.46. Толуидиновый синий (1:1000).
5.3.47. Сафранин (1:10000 спирта 10 °С).
5.3.48. Индигокармин.
5.3.49. Раствор пирогалловой кислоты 50%.
5.3.50. Нейтральрот (1:1000).
5.3.51. Акридиновый оранжевый.
5.3.52. Корифосфин.
5.3.53. Примулин.
5.3.54. Ауролин.
5.3.55. Сульфат берлерина.
5.3.56. Трипафлавин.
5.3.57. Риванол.
5.3.58. Акрихин.
5.4. Насыщенные растворы
При проведении санитарно-паразитологических исследований используют насыщенные растворы для методов флотации.
Приготовление флотационных растворов
5.4.1. Раствор нитрата натрия с плотностью 1,38 - 1,40 готовят из расчета 1000 г соли на 1 л воды. Соль насыпают в эмалированное ведро с горячей водой порциями при постоянном помешивании до полного растворения. Раствор доводят до кипения, пока не появится на его поверхности кристаллическая пленка. Приготовленный раствор после остывания переливают в другие крупные емкости (бутыли). О насыщенности раствора судят по наличию на дне сосудов кристаллов соли или измеряют ареометром его плотность.
5.4.2. Раствор нитрата аммония, или гранулированной аммиачной селитры, с плотностью 1,3 готовят таким же способом, что и предыдущий раствор, но из расчета 1500 г соли на 1 л горячей воды.
5.4.3. Раствор Брудастова: натриевая селитра - 900 г, калиевая селитра - 400 г, вода - 1 л. После подогревания и растворения солей плотность насыщенного раствора - 1,47 - 1,48. Но через 24 часа она снижается до 1,40 - 1,42. Поэтому раствор следует готовить перед проведением исследований.
5.4.4. Раствор тиосульфата натрия (гипосульфита натрия Na2SO3 5Н2О) плотностью 1,4 готовят из расчета 1750 г вещества на 1 л воды.
Образующийся на дне сосуда осадок используют при следующем приготовлении насыщенного раствора.
6. Основные методы
санитарно-паразитологических исследований
6.1. Исследование почвы
Подготовка к отбору проб. Отбор проб для паразитологических анализов проводят не менее 1 раза в год для оценки качественного состояния почв естественного и нарушенного сложения.
Для аналогичных исследований почв детских, лечебно-профилактических учреждений и зон отдыха отбор проб проводят не менее 2 раз в год - весной и осенью.
При изучении динамики самоочищения от яиц гельминтов, цист кишечных простейших отбор проб проводят в течение первого месяца еженедельно, а затем ежемесячно в течение вегетационного периода до завершения активной фазы самоочищения.
Для оценки качества по паразитологическим показателям почв сельскохозяйственных угодий, в зависимости от характера источника загрязнения, возделываемой культуры и рельефа местности на каждые 0,5 - 20,0 га территории закладывают не менее 1 пробной площадки размером 10 х 10 м; на территории расположения детских и лечебно-профилактических учреждений, игровых площадок, выгребов, мусорных ящиков и других объектов, занимающих небольшие площади, размер пробной площадки должен быть не более 5 х 5 м.
Отбор проб почвы. Точечные пробы отбирают в соответствии с МУ 2.1.7.730-99 на модельной площадке из одного или нескольких слоев или горизонтов методом конверта, по диагонали или любым другим способом с таким расчетом, чтобы каждая проба представляла собой часть почвы, типичной для генетических горизонтов или слоев данного типа.
Точечные пробы отбирают ножом, совком или шпателем из прикопок или почвенным буром Некрасова. Объединенную пробу составляют путем смешивания точечных проб, отобранных на одной пробной площадке.
Для паразитологического анализа с каждой пробной площадки берут одну объединенную пробу массой 200 г, составленную из 10 точечных проб массой 20 г каждая, отобранных послойно с поверхности и глубины 10 - 20 см. При необходимости отбор проб проводят из более глубоких (40 - 60 см) слоев почвы послойно. Пробы помещают в банки с крышками или пакеты из клеенки, пластика, этикетируют с указанием места отбора, даты, глубины, характера исследуемого участка (в тени или на солнце, состав почвы, наличие растительности и т.д.). Все объединенные пробы должны быть зарегистрированы в журнале, пронумерованы. В процессе транспортирования и хранения почвенных проб должны быть приняты меры по предупреждению возможности их загрязнения.
Паразитологический анализ проб почвы проводят в день доставки их в лабораторию. При невозможности немедленного проведения исследований пробы почвы хранят в холодильнике при температуре до 5 °С. Для исследования на цисты кишечных патогенных простейших почву без обработки хранят не более 2 суток; на яйца биогельминтов - до 7 суток, а на яйца геогельминтов - не более 1 месяца.
Для предотвращения высыхания и развития личинок в яйцах геогельминтов почву увлажняют и аэрируют один раз в неделю, для чего пробы вынимают из холодильника и оставляют на 3 часа при комнатной температуре, увлажняют водой по мере потери влаги и снова помещают для хранения в холодильник. При необходимости хранения проб почвы более месяца применяют консервирующие средства: почву пересыпают в кристаллизатор, заливают раствором формалина с массовой долей 3%, приготовленным на изотоническом растворе натрия хлористого с массовой долей 0,85% (жидкость Барбагалло), или раствором соляной кислоты с массовой долей 3%, а затем ставят в холодильник.
Подготовка проб почвы к анализу. Пробы почвы в лаборатории рассыпают на бумаге или кальке и разминают пестиком крупные комки. Затем из нее выбирают корни растений, камни, насекомых, стекло, уголь, кости животных, друзы гипса, известковые журавчики и др.
Затем почву переносят в ступку, растирают пестиком и просеивают через сито с ячейками диаметром 1 мм.
6.1.1. Метод исследования почвы на яйца гельминтов по Романенко Н.А. (1996)
Ход исследования. Из объединенной пробы берут 25 г почвы, помещают в центрифужные пробирки объемом 250 мл (в случае отсутствия таковых можно пользоваться пробирками объемом 80 - 100 мл, но помещать в них следует 15 г почвы) и заливают 3%-ным раствором натриевой или калиевой щелочи (в соотношении 1:1). После этого содержимое пробирок тщательно размешивают при помощи электромешалки или стеклянных палочек, отстаивают в течение 20 - 30 мин. и центрифугируют 5 минут при 800 об./мин. Надосадочную жидкость сливают, а почву промывают водой (1 - 5 раз в зависимости от типа почвы: для песчаных и супесчаных - достаточно одной промывки, для глинистых, суглинистых, черноземных - от 2 до 5) до получения прозрачной надосадочной жидкости. После промывки к почве добавляют 150 мл (45 мл в пробирки объемом 100 мл) насыщенного (плотность 1,38 - 1,40) раствора нитрата натрия, тщательно размешивают и центрифугируют. Пробирки устанавливают в штатив, доливают тем же раствором соли до уровня на 2 - 3 мм ниже краев пробирок и накрывают предметными стеклами. Яйца гельминтов всплывают и концентрируются в поверхностной пленке насыщенного раствора. Поэтому очень важно исключить какую-либо потерю ее.
Для этого между краем пробирки и предметным стеклом оставляют пространство шириной не более 10 мм, куда с помощью пипетки вносят насыщенный раствор соли до его соприкосновения с нижней стороной стекла, последнее осторожно передвигают до полного покрытия центрифужной пробирки. Через 20 - 25 минут отстоя стекла снимают, переворачивая нижней поверхностью вверх, а на их место ставят другие (при необходимости и третьи). На предметные стекла наносят несколько капель 30%-ного раствора глицерина и накрывают их покровными стеклами, а затем микроскопируют. Для обнаружения яиц гельминтов препарат просматривают при увеличении в 80, а для определения степени их развития или деформации - в 400 раз.
При необходимости приготовленные препараты можно хранить в холодильнике до 5 - 7 суток. При подсыхании препаратов по краям покровных стекол добавляют несколько капель 30%-ного раствора глицерина.
Эффективность метода колеблется от 59,6 - 83,1%, в среднем - 73,0%.
Для определения истинной обсемененности почвы яйцами аскарид и власоглава необходимо определить ее тип, а затем умножить число обнаруженных яиц гельминтов на коэффициент для этого типа почвы и для данного вида гельминтов (табл. 2).
Таблица 2
ПОПРАВОЧНЫЕ КОЭФФИЦИЕНТЫ
ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ИСТИННОЙ ОБСЕМЕНЕННОСТИ ПОЧВ
ЯЙЦАМИ АСКАРИД И ВЛАСОГЛАВОВ
----------------------------------T------------------------------¬
¦ Тип почвы ¦ Яйца геогельминтов ¦
¦ +--------------T---------------+
¦ ¦ аскарид ¦ власоглавов ¦
+---------------------------------+--------------+---------------+
¦Дерново-подзолистая (супесь) ¦ 1,23 ¦ 1,43 ¦
+---------------------------------+--------------+---------------+
¦Дерново-подзолистая (суглинок) ¦ 1,45 ¦ 1,50 ¦
+---------------------------------+--------------+---------------+
¦Торфяно-глоевые ¦ 1,84 ¦ 2,40 ¦
+---------------------------------+--------------+---------------+
¦Чернозем обыкновенный ¦ 1,60 ¦ 1,85 ¦
+---------------------------------+--------------+---------------+
¦Чернозем типичный ¦ 1,70 ¦ 2,30 ¦
+---------------------------------+--------------+---------------+
¦Чернозем выщелоченный ¦ 1,43 ¦ 2,10 ¦
+---------------------------------+--------------+---------------+
¦Чернозем каштановый (супесь) ¦ 1,28 ¦ 1,95 ¦
+---------------------------------+--------------+---------------+
¦Чернозем каштановый (суглинок) ¦ 1,64 ¦ 2,15 ¦
+---------------------------------+--------------+---------------+
¦Аллювиально-лугово-лесная ¦ 1,37 ¦ 1,65 ¦
+---------------------------------+--------------+---------------+
¦Сероземы ¦ 1,39 ¦ 1,60 ¦
+---------------------------------+--------------+---------------+
¦Черноземная лесная коричневая ¦ 1,49 ¦ 1,71 ¦
+---------------------------------+--------------+---------------+
¦Горная лесная бурая ¦ 1,54 ¦ 1,72 ¦
+---------------------------------+--------------+---------------+
¦Желтоземы ¦ 1,79 ¦ 1,94 ¦
L---------------------------------+--------------+----------------
Для обнаружения в почве яиц гельминтов, имеющих более высокую плотность (яйца описторхисов, клонорхисов), чем яйца аскарид и власоглавов, следует использовать насыщенный раствор хлорида цинка (плотность 1,78); яйца токсокар лучше выявляются при обработке почвы насыщенным раствором сульфата цинка или сульфата магния в смеси с 5%-ным раствором йодата калия.
Примечание. При работе по данной методике необходимо строго соблюдать следующие требования:
1. Обязательность применения обезжиренных предметных стекол.
2. Обязательность контроля плотности насыщенного раствора с помощью ареометра (плотность должна быть не ниже 1,38 - 1,40).
В случае нарушения указанных требований в первом случае поверхностная пленка с яйцами гельминтов не прилипнет к стеклу, во втором случае скорость всплывания яиц гельминтов замедлится и в указанные сроки они не достигнут поверхностной пленки.
Для эффективного использования рабочего времени исследователя рекомендуется: во время первого отстаивания смеси "почва с щелочью" проводить подготовку предметных и покровных стекол, запись в журнале; во время второго - "почвы с насыщенным раствором соли" - подготовку рабочего места для микроскопирования, уборку центрифуги и другого лабораторного оборудования.
После окончания проведения анализов использованную посуду (центрифужные пробирки, предметные и покровные стекла, стеклянные палочки) замачивают в стиральном порошке и кипятят 15 - 20 минут, затем моют в чистой воде.
Пробирки хранят в штативах, предметные и покровные стекла в широкогорлых банках с пробками, заполненных смесью Никифорова или нашатырным спиртом. Перед использованием предметные и покровные стекла не вытирают, а подсушивают.
6.1.2. Метод исследования почвы на личинки гельминтов по Берману
Ход исследования. Из объединенной пробы берут 20 г почвы и помещают на металлическую сетку (или ситечко для молока), которую устанавливают в аппарат Бермана. Последний представляет собой стеклянную воронку (диаметром 10 - 15 см), соединенную при помощи резиновой трубки с узкой пробиркой. Систему устанавливают в штатив, наполняют теплой (температура 45 - 50 °С) водой, а затем металлическую сетку с почвой помещают в воронку так, чтобы нижняя часть ее соприкасалась с водой.
Воронку с почвой ставят в термостат при температуре 37 °С. Личинки гельминтов, обладая термотропностью, мигрируют из почвы через сито в теплую воду и оседают на дно пробирки. Через 3 - 4 часа осторожно отсоединяют пробирку от воронки, сливают верхний слой жидкости, а осадок переносят на предметное стекло и микроскопируют. Но лучше содержимое пробирки центрифугировать, а после этого исследовать осадок.
Метод Супряги
В химический стаканчик помещают 10 г почвы, заливают теплым (40 °С) физраствором так, чтобы он полностью покрывал пробу. Через 20 минут жидкость сливают в чашку Петри и исследуют под бинокулярным микроскопом МБС. По эффективности метод Супряги не уступает методу Бермана.
Для отличия личинок свободноживущих нематод от паразитических применяют метод Корта. Принцип его заключается в воздействии на личинок нематод формалином. При этом личинки свободноживущих нематод погибают быстрее, чем паразитические. Личинки помещают в воду в чашку Петри или на часовое стекло. При добавлении 40%-ного раствора формалина к жидкости с личинками нематод в соотношении 1:5 личинки свободноживущих нематод гибнут через 5 - 8 минут, а паразитические - остаются живыми в течение 15 - 20 минут, но подвижность их замедляется; при добавлении формалина в соотношении 1:25 первые гибнут через 12 минут, тогда как вторые в 95% случаев остаются нормально подвижны.
6.1.3. Метод исследования почвы на цисты кишечных простейших по Падченко И.К. (1992)
Ход исследования. Из объединенной пробы берут 25 г почвы, помещают в фаянсовую ступку, постепенно добавляют к ней водопроводную воду, тщательно растирают пестиком до гомогенной кашицы и выливают ее в цилиндр емкостью 1 л, предварительно наполненный на 3/4 объема чистой водой. Смесь размешивают стеклянной палочкой и отстаивают в течение 15 минут. Образовавшуюся на поверхности смеси пленку удаляют петлей, а жидкую часть ее отсасывают сифоном в чистый цилиндр. Осадок повторно промывают (не менее 3 раз), собирая промывные воды в одном цилиндре. Промывные воды отстаивают, через 24 часа надосадочную жидкость удаляют сифоном, а осадок исследуют в нативных мазках и окрашенных раствором Люголя препаратах. С этой целью осадок тщательно встряхивают и одну каплю полученной взвеси наносят пастеровской пипеткой на предметное стекло, накрывают покровным стеклом и исследуют под световым микроскопом. Микроскопируют не менее 1 мл осадка с последующим пересчетом на его общий объем. Анализ осадка проводят в течение первых 2 - 3 суток после его получения.
Для того, чтобы осадок длительное время оставался пригодным к исследованию (до 2 месяцев), к нему добавляют консервант, содержащий мертиолят, 40%-ный раствор формалина, спирт этиловый 96° и физиологический раствор (соотношение компонентов в %: мертиолят - 0,0016 - 0,0018, 40%-ный формалин - 4,1 - 4,4; спирт этиловый 96° - 10,4 - 10,9; физиологический раствор - остальное). Консервант добавляют к осадку в соотношении 1:2 и хранят в холодильнике.
Для приготовления мазков каплю исследованной смеси осадка с консервантом после встряхивания наносят пипеткой на предметное стекло, смешивают ее с каплей акридинового оранжевого, разведенного 1:500, накрывают покровным стеклом и исследуют под световым или люминесцентным микроскопом, подсчитывают число неокрашенных (живых) и окрашенных (мертвых и дегенерирующих) цист кишечных простейших каждого вида. При изучении исследуемого материала под световым микроскопом жизнеспособные цисты кишечных простейших остаются неокрашенными, а дегенерирующие и мертвые цисты окрашиваются в желтый цвет. Погибшие цисты под люминесцентным микроскопом красные.
6.2. Исследование воды
6.2.1. Методы исследования воды поверхностных водоемов, питьевой воды и воды плавательных бассейнов изложены в Методических указаниях (МУК 4.2.668-97) "Санитарно-паразитологическое исследование воды". М., 1997.
6.2.2. Исследование сточной воды
Отбор проб. Пробы сточных вод отбирают на входе и выходе с очистных сооружений (механическая очистка, аэро- и биостанции, компактные установки, биологические пруды, поля фильтрации), на полях орошения и в местах сброса их в поверхностные водоемы.
Количество сточных вод на одну пробу должно быть не менее: неочищенной (до поступления на очистные сооружения) - 1 л, после сооружений механической очистки - 3 л, в остальных случаях - 10 л.
Отбор проб сточных вод проводят в резиновых перчатках при помощи емкостей 200 - 500 мл. Отдельные порции сточных вод сливают в широкогорлые пластиковые или стеклянные емкости соответствующего объема.
При определении эффективности работы очистных сооружений по паразитологическим показателям следует строго соблюдать следующее правило: после отбора проб входящей на очистные сооружения сточной воды последующие пробы отбирают с учетом времени ее нахождения на каждом этапе очистки, т.е. после первичных отстойников - через 2,5 часа, аэротенков - 8,5 часа, вторичных отстойников - 10,5 часа, хлораторной - через 11 часов.
Пробы этикетируют, регистрируют в журнале и доставляют в лабораторию, где их хранят в прохладном месте не более суток.
6.2.2.1. Метод исследования сточных вод на яйца гельминтов по Романенко И.Л. (1996)
Ход исследования. В каждую пробу сточных вод добавляют один из следующих коагулянтов: сульфат алюминия, сульфат железа, сульфат меди в дозе 0,5 - 0,6 г/л и тщательно размешивают. Полное осветление стоков наступает через 40 - 50 минут. После слива надосадочной жидкости осадок помещают (равномерно распределяя) в пробирки объемом 250 мл и центрифугируют в течение 3 минут при 1000 об./мин. Воду сливают, а к осадку добавляют 2 - 4 мл 1 - 3% раствора соляной кислоты для растворения хлопьев коагулянта.
Смесь размешивают и центрифугируют, жидкость сливают, а осадок обрабатывают по методике Романенко для исследования почвы. Для облегчения доставки проб сточных вод и сокращения времени на ее первичную обработку внесение коагулянта можно производить или после доставки сточной воды в лабораторию, или до отбора проб воды. Коагуляция начинается сразу же после заполнения посуды водой. В лабораторию доставляют только осадок сточных вод, который и обрабатывают.
Эффективность метода от 82 до 91%, в среднем - 86%.
6.2.2.2. Метод исследования сточной воды на цисты кишечных простейших по Падченко К.И. (1992)
Ход исследования. Пробы сточных вод отстаивают в течение 12 - 16 часов, затем надосадочную жидкость сливают, осадок переносят в центрифужные пробирки и центрифугируют 5 минут при 1000 об./мин. Надосадочную жидкость удаляют, осадок переносят на предметное стекло, добавляют консервант и исследуют под световым микроскопом.
Жизнеспособные цисты кишечных простейших остаются в составе этих консервантов неокрашенными. Дегенерирующие цисты окрашиваются красителем в фиолетовый цвет.
Эффективность метода, в среднем - 90%.
6.3. Исследование поверхностного стока
Отбор проб. При определении роли дождевого или паводкового стоков в обсеменении поверхностных водоемов яйцами гельминтов и цистами кишечных простейших пробы их отбирают из естественных водотоков во время дождей по окраинам населенных пунктов или в местах перед их попаданием в водоемы. Пробы воды отбирают отдельными порциями (кружками или банками) по 0,5 л из движущегося потока в широкогорлую стеклянную или пластиковую посуду с крышкой. Объем пробы - 1 л.
Можно отбирать пробы поверхностного стока и другим способом. По основным водотокам устраивают так называемые "ловушки" - ямы размером 0,5 х 0,5 х 0,1 м. Во время дождя в них происходит накопление воды поверхностного стока, из которой и отбирают пробы. При этом отбирают как воду - во флаконы, так и поверхностный слой почвы (0 - 1 см) - в пластиковые пакеты (200 г на пробу).
Пробы этикетируют, регистрируют в журнале и доставляют в лабораторию, где их хранят в холодильнике не более суток.
Ход исследования. Санитарно-паразитологическое исследование проб поверхностного стока проводят по описанным выше методикам исследования почвы и сточных вод по Романенко Н.А. и Падченко И.К.
6.4. Исследование донных отложений
Отбор проб. Пробы донных отложений отбирают в поверхностных водоемах выше, на и ниже мест сброса в них сточных вод, их осадков, навозных стоков, а также в местах водозабора и попадания стоков с поверхности территорий населенных пунктов, индивидуальных и фермерских хозяйств.
Для отбора проб применяют различные системы пробоотборников: дночерпатели, драги и трубки различных конструкций. Отбор проб донных отложений ручным или механизированным способом проводят с берега или различных плавсредств. Пробы объемом 200 г помещают в широкогорлые стеклянные или пластиковые емкости с крышками, этикетируют, регистрируют в журнале и доставляют в лабораторию, где их хранят в холодильнике.
Ход исследования. Из объединенной пробы берут 4 навески по 25 г донных отложений и помещают в центрифужные пробирки объемом 250 мл, добавляют 150 мл чистой воды и тщательно перемешивают стеклянной палочкой. Смесь центрифугируют 5 минут при 1000 об./мин., затем надосадочную жидкость сливают, а к осадку вновь доливают 150 мл чистой воды. Промывку проводят 3 - 5 раз, до получения чистой надосадочной жидкости.
Промытый осадок далее исследуют по описанным выше методикам для исследования почвы на яйца гельминтов по Романенко Н.А. и цисты кишечных простейших по Падченко И.К.
6.5. Исследование осадков сточных вод
Отбор проб. Пробы "сырых" (97 - 98% влажности) осадков сточных вод из первичных и вторичных отстойников, а также с иловых площадок очистных сооружений берут с помощью черпака или кружки отдельными порциями по 100 - 200 мл и сливают в широкогорлые стеклянные или пластиковые сосуды объемом 1 л с притертыми или завинчивающимися крышками.
Пробы обезвоженных (до 70% влажности) осадков сточных вод берут совком или лопатой навесками по 50 г с 4 - 5 мест иловых площадок (2 - 3-летнего выдерживания осадка), компостных буртов, объединяют в одну пробу массой 200 - 250 г. Пробы помещают в пластиковые пакеты или баночки с крышками, этикетируют, регистрируют в журнале и доставляют в лабораторию, где их хранят в холодильнике в течение 1 - 2 суток.
6.5.1. Методика исследования осадков сточных вод на яйца гельминтов по Романенко Н.А. (1996)
Ход исследования. "Сырой" осадок сточных вод обезвоживают: 100 - 150 мл осадка помещают в центрифужные пробирки объемом 250 мл (30 - 45 мл в пробирки объемом 84 мл) и центрифугируют в течение 5 минут при 1000 об./мин. Воду сливают, а к осадку доливают такую же порцию чистой воды и размешивают стеклянной палочкой в течение 1 - 2 минут, снова центрифугируют. Промывку осадка проводят 2 - 3 раза.
Промывку обезвоженных (влажность 70% и ниже) осадков сточных вод проводят аналогичным способом при тех же технологических режимах, помещая в центрифужные пробирки объемом 250 мл по 25 г осадка и 150 мл чистой воды.
После промывки к осадку в каждую центрифужную пробирку добавляют по 3 - 5 г чистого песка, тщательно размешивают и исследуют на яйца гельминтов по вышеописанной методике Романенко Н.А. для обработки почвы.
6.5.2. Методика исследования осадков сточных вод на цисты кишечных простейших по Падченко И.К. (1992)
Ход исследования. Пробу осадка сточных вод, 98% влажности объемом 1 л или 0,2 кг при плотной его консистенции (70% влажности), тщательно растирают пестиком в большой фарфоровой ступке, постепенно добавляя к нему (до общего объема 1,5 л) водопроводную воду. Полученную взвесь выливают в цилиндр емкостью 2,0 л и отстаивают. Через 15 минут надосадочную жидкость переливают сифоном в цилиндр емкостью 5,0 л, а осадок повторно отмывают (2 - 3 раза) чистой водой путем встряхивания в цилиндре емкостью 2,0 л. Полученную при отмывании и собранную в большом цилиндре жидкую часть отстаивают 12 - 16 часов, надосадочную жидкость удаляют сифоном, а осадок исследуют под световым или люминесцентным микроскопом по вышеописанной методике исследования сточной воды по Падченко И.К.
6.6. Методы исследования навоза
и навозных стоков по Романенко Н.А. и Черепанову А.А.
Отбор проб. Пробы навоза и навозных стоков берут из навозосборников, навозоотстойников отдельными порциями (0,1 - 0,2 л) из 5 - 10 точек. Усредненную объединенную пробу навоза и навозных стоков объемом 1 л помещают в широкогорлые стеклянные или пластиковые сосуды с притертыми пробками или завинчивающимися крышками. Обезвоженную твердую фракцию (влажность до 70%) навоза массой 200 г помещают в полиэтиленовые пакеты или баночки. Пробы этикетируют, регистрируют в журнале и доставляют в лабораторию.
При невозможности исследования проб навоза в день доставки в лабораторию допускается их хранение в холодильнике или в другом месте при температуре от 0° до 20 °С в течение 2 суток. Чтобы не допустить развития в навозе и навозных стоках гнилостных процессов в пробы добавляют 3 - 5 капель толуола.
Ход исследования. В фарфоровую ступку помещают 100 г твердой фракции навоза, добавляют 300 мл воды и перемешивают. Полученную смесь навоза, так же как и пробу навозных стоков, фильтруют через двойной слой марли, уложенный на металлический каркас. Фильтрование проводят под напором струи воды, подаваемой по резиновому шлангу из водопроводного крана. Фильтрат переносят в центрифужные пробирки и центрифугируют 3 минуты при 1500 об./мин. Надосадочный слой сливают, а к осадку добавляют насыщенный раствор нитрата натрия и снова центрифугируют. После этого в пробирки добавляют тот же флотационный раствор (до образования мениска), покрывают предметными стеклами, а через 20 минут их снимают и микроскопируют поверхностную пленку.
6.7. Методы исследования смывов
с предметов обихода, рук, игрушек
Отбор проб. При определении обсемененности возбудителями паразитарных болезней предметов обихода смывы берут с посуды, скатертей или клеенок, мебели, ковров, нательного и постельного белья, халатов, спецодежды, ночных горшков, игрушек, дверей, парт, спортивного инвентаря, поручней, а также с рук детей, персонала детских учреждений, работников пищеблока, официантов, поливальщиков на оросительных системах с использованием сточных вод, их осадков, животноводческих стоков, персонала водоочистных и канализационных очистных сооружений.
Смывы берут в столовых, магазинах, детских дошкольных и школьных учреждениях, оздоровительных и спортивных лагерях, детских домах, лечебно-профилактических учреждениях, общежитиях, библиотеках, театрах, музеях, парикмахерских, плавательных бассейнах, спортивных залах, банях, фермах, теплицах, маслозаводах, мясокомбинатах, мастерских по выделке шкур и пошиву меховых изделий.
Для отбора смывов применяют плотные ватно-капроновые тампоны, беличьи кисточки, смоченные в 1%-ном растворе едкого натра, или в 10%-ном растворе глицерина, или стирального порошка. В одну пробу, т.е. в пробирку, можно собирать смывы с нескольких однородных предметов. Смывы с рук персонала берут у каждого отдельно, чтобы при обнаружении яиц гельминтов или (и) цист кишечных простейших можно было знать, какой именно сотрудник нарушает правила гигиены.
При взятии проб нужно соблюдать определенную очередность. Например, в детских учреждениях пробы вначале берут в пищеблоке, а затем в столовой, игровой комнате, спальне, умывальной и, в заключение, в санузле. Во всех детских учреждениях пробы желательно брать не менее 2 раз в год (летом и зимой). В очагах, где проводятся комплексные оздоровительные мероприятия, смывы необходимо брать значительно чаще (1 - 3 раза в квартал).
6.7.1. Метод исследования смывов на яйца гельминтов
Ход исследования. Кисточки или тампоны помещают в центрифужные пробирки и обмывают в 1%-ном растворе едкого натра или в 10%-ном растворе глицерина, после чего жидкость центрифугируют, а осадок переносят на предметное стекло и микроскопируют.
Для снятия яиц гельминтов с рук людей рекомендуется мыть их щеткой в 2 - 3%-ном растворе питьевой соды или 1%-ном растворе едкого натра; смывные воды центрифугируют и исследуют, осадок можно также профильтровать в аппарате Гольдмана и затем исследовать фильтры. На руках особенно тщательно обмываются пальцы и подногтевые пространства.
6.7.2. Метод исследования смывов на цисты кишечных простейших
Ход исследования. Ватно-капроновые тампоны или кисточки со смывом ополаскивают в воде, затем сливают жидкость в высокий цилиндр емкостью 0,5 - 1 л с чистой водой, которую наливают с таким расчетом, чтобы при добавлении смыва не превысить общую емкость цилиндра. Всплывшие на поверхность жидкости кусочки бумаги, ткани и другие крупные частицы удаляют петлей с сеткой, а оставшуюся жидкость отстаивают в течение 12 - 16 часов, надосадочную жидкость удаляют, а к осадку добавляют консервант и исследуют по методике, описанной выше для других осадков (сточные воды).
6.8. Метод исследования снега по Чернышовой Л.Г. (1996)
Отбор проб. Пробы снега отбирают в специальные мешочки-фильтры. Они представляют собой устройство в виде мешочка-кисета круглой формы радиусом 30 - 50 см, сшитых из сатина, репса, перкаля, бязи с ячейками диаметром 0,08 - 0,04 х 0,04 - 0,012 мм. По краю мешочки подогнуты и прошиты для шнура, затягивающего их. Мешочки со снегом выдерживают при комнатной температуре в подвешенном состоянии над тазами. После таяния снега на дне мешочков остается осадок. Дно мешочков смачивают глицерином, мешочки складывают, упаковывают в полиэтиленовые пакеты, этикетируют и доставляют в лабораторию, где до их исследования хранят в холодильнике.
Ход исследования. В лаборатории осадок из мешочков смывают небольшим (0,5 л) количеством воды. Смывные воды разливают в пробирки объемом 250 мл и центрифугируют 15 минут при 1500 об./мин. Надосадочную жидкость сливают, а осадок переносят на предметные стекла и микроскопируют.
6.9. Метод исследования твердых бытовых отходов
Отбор проб. Пробы твердых бытовых отходов берут в коммунальных и индивидуальных домовладениях, детских дошкольных и школьных учреждениях, больницах (инфекционные отделения), мусоросортировочных и мусороперерабатывающих заводах.
Используют два способа отбора проб:
а) из недробленых твердых бытовых отходов отбирают крупные предметы, в т.ч. бумагу, тряпки, кости, не имеющие признаков фекального загрязнения, а из оставшейся массы отбросов для исследования отбирают 200 - 250 г;
б) из дробленых твердых бытовых отходов, предназначенных и для химического исследования, пробы берут также в количестве 200 - 250 г.
Пробы

КОНЦЕПЦИЯ ОБРАЩЕНИЯ С ТВЕРДЫМИ БЫТОВЫМИ ОТХОДАМИ В РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ. МДС 13-8.2000 (утв. Постановлением Коллегии Госстроя РФ от 22.12.1999 n 17)  »
Постановления и Указы »
Читайте также