МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ К ПОСТАНОВКЕ ИССЛЕДОВАНИЙ ПО ИЗУЧЕНИЮ РАЗДРАЖАЮЩИХ СВОЙСТВ И ОБОСНОВАНИЮ ПРЕДЕЛЬНО ДОПУСТИМЫХ КОНЦЕНТРАЦИЙ ИЗБИРАТЕЛЬНО ДЕЙСТВУЮЩИХ РАЗДРАЖАЮЩИХ ВЕЩЕСТВ В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ (утв. Минздравом СССР 11.08.1980 n 2196-80)


Утверждаю
Заместитель Главного
государственного
санитарного врача СССР
А.И.ЗАИЧЕНКО
11 августа 1980 г. N 2196-80
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
К ПОСТАНОВКЕ ИССЛЕДОВАНИЙ ПО ИЗУЧЕНИЮ РАЗДРАЖАЮЩИХ
СВОЙСТВ И ОБОСНОВАНИЮ ПРЕДЕЛЬНО ДОПУСТИМЫХ КОНЦЕНТРАЦИЙ
ИЗБИРАТЕЛЬНО ДЕЙСТВУЮЩИХ РАЗДРАЖАЮЩИХ ВЕЩЕСТВ
В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ
Методические указания разработаны И.В. Саноцким и Н.Г. Ивановым при участии и использовании материалов Н.Г. Иванова, А.Л. Германовой, Р.П. Радионовой (НИИ гигиены труда и профзаболеваний АМН СССР) и С.В. Суворова (ВНИИИЖГ).
Методические указания предназначены для научно-исследовательских институтов, гигиенических кафедр медицинских институтов, лабораторий санитарно-эпидемиологических станций и лабораторий других ведомств, занимающихся разработкой санитарных стандартов содержания вредных веществ в воздухе рабочей зоны.
ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ
Многие промышленные химические соединения обладают раздражающими свойствами.
Показателем выраженности раздражающих свойств промышленных
веществ служит величина порога раздражающего действия (Lim ),
ir
которая является одним из лимитирующих показателей при
гигиеническом нормировании. Особенно велика роль указанного
параметра токсикометрии при установлении ПДК избирательно
действующих раздражающих ядов.
К избирательно действующим раздражающим веществам относятся те
химические соединения, у которых зона раздражающего действия,
равная отношению порога острого действия по интегральным
показателям (Lim ) к порогу раздражающего действия
ас
Lim
ас
(Z = -----), более 1.
ir Lim
ir
В клинической картине острого и хронического отравления избирательно действующими раздражающими веществами преобладают симптомы поражения дыхательной системы, кожи и слизистой оболочки глаз.
Цель настоящих Методических указаний - способствовать получению однородных материалов, а также выбору оптимального объема исследований, необходимых для обоснования ПДК веществ, обладающих раздражающими свойствами, в воздухе рабочей зоны.
Предлагаемая программа исследований (последовательность, объем, методы и т.д.) не должна связывать творческой инициативы научных коллективов и отдельных научных сотрудников в плане привлечения и использования дополнительных и особенно новых адекватных методов.
При Z > 1 возможно установление ПДК промышленного вещества в
ir
воздухе рабочей зоны по сокращенной программе с определением
токсичности вещества при ингаляции, изучении характера вредного
действия при нанесении на кожу и слизистые оболочки глаз,
установлении порогов острого действия по интегральным показателям
и показателям раздражающего действия при ингаляции.
Установленная по указанной программе ПДК вредного вещества отвечает всем требованиям, предъявляемым к ПДК, согласно ГОСТ 12.1.005-76 "ССБТ. Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования".
Предварительный отбор вещества для исследования по приведенной ниже программе проводят по физико-химическим свойствам. Предпочтение отдается веществам, обладающим кислотными или щелочными свойствами, близким по химической структуре и физико-химическим свойствам к ядам, обладающим раздражающим действием, и пр.
Окончательный отбор промышленных веществ проводят на основании результатов изучения их действия на кожу экспериментальных животных, которое выполняется и оценивается в соответствии с настоящими Методическими указаниями (п. 1).
К исследованию целесообразно привлекать вещества, относящиеся к 3 и выше классам приведенной в Методических указаниях классификации химических соединений по выраженности раздражающего действия на кожу.
Вещества, относящиеся к неизученным и мало изученным классам химических соединений или опасные в плане развития отдаленных и необратимых эффектов, не могут исследоваться по приведенной ниже сокращенной программе обоснования ПДК в воздухе рабочей зоны.
Обязательно наличие метода количественного определения вещества в воздухе, отвечающего требованиям ГОСТ 12.1.005.76 "ССБТ. Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования".
1. ИССЛЕДОВАНИЕ РАЗДРАЖАЮЩЕГО ДЕЙСТВИЯ ВЕЩЕСТВА
ПРИ АППЛИКАЦИИ НА КОЖУ
1.1. Изучение влияния вещества на кожу проводится на двух видах экспериментальных животных (кролики и морские свинки). Используются кролики породы "Шиншилла" или альбиносы, а также морские свинки светлой масти. Количество животных в группе не менее 8 - 10 особей. Среди животных одной группы максимальная разница в массе тела должна составлять не более 10%. Участок аппликации составляет для кроликов 7 x 8 см и для морских свинок - 5 x 5 см.
За 1 - 2 дня до эксперимента тщательно выстригают шерсть на участке аппликации (применение депилятора недопустимо!). В опыт пригодны животные с чистой здоровой кожей без механических повреждений. Шерсть выстригают на симметричных участках спины по обе стороны от позвоночника, оставляя шерстный покров между ними в 2 см. Правый бок служит для аппликации изучаемого вещества, левый - для контроля.
На время экспозиции животных фиксируют для исключения слизывания продукта с кожи. Фиксация должна осуществляться наиболее физиологичным методом. С этой целью для кроликов применяют специальные станки или полужесткие воротники (из резины, пластика или линолеума). Морских свинок помещают в индивидуальные домики.
1.2. Время экспозиции - 4 часа. Время наблюдения после однократной аппликации - 2 недели.
Исследуемый продукт наносится на кожу из расчета 20 мг/кв. см.
1.3. Изучаемые соединения наносят на кожу, как правило, в нативном виде. В случае невозможности нанесения вещества в чистом виде или при наличии выраженного раздражающего действия применяют разведение химического вещества. В качестве растворителя и разбавителя следует использовать дистиллированную воду или модельную среду, имитирующую потовую жидкость (Приложение 1). При невозможности разведения веществ в перечисленных выше растворителях допускается применение растительного и вазелинового масла, этилового спирта или ацетона.
Нанесение вещества осуществляется открытым способом при температуре окружающей среды 18 - 24 град. C. Для летучих веществ (температура кипения до 160 град. C) следует использовать закрытый способ: компрессный метод Ведрова и Долгова, метод наклейки капсул и часовых стекол, применение камер КИИД-1.
На контрольный участок кожи животного наносится растворитель или разбавитель, используемый в опыте.
1.4. После окончания экспозиции остатки продукта удаляются теплой водой с мылом. Необходимо избегать грубых манипуляций, способных вызвать изменение кожи.
1.5. Реакцию кожи регистрируют по окончании экспозиции, через 1 и 16 часов после однократной аппликации и оценивают по сравнению с симметричным участком кожи того же животного. Функциональные нарушения кожи характеризуются появлением различной степени эритемы, отека, трещин, изъязвлений, изменением температуры кожи, скорости проницаемости эпидермиса, снижением сопротивления кожи постоянному электрическому току, уменьшением ее нейтрализующей способности.
Оценка эритемы и отека кожи животных проводится по шкале, приведенной в табл. 1.
Таблица 1
ОЦЕНКА ФУНКЦИОНАЛЬНОГО СОСТОЯНИЯ КОЖИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ
ЖИВОТНЫХ ПРИ ИЗУЧЕНИИ МЕСТНОГО ДЕЙСТВИЯ ВЕЩЕСТВ
а) Оценка степени эритемы.
Выраженность эритемы измеряется визуально или предпочтительнее с помощью колориметрической линейки С.В. Суворова и В.В. Чернышевой и оценивается в баллах.
----------------------------------------------T------------------¬
¦ Интенсивность эритемы (визуально) ¦Оценка эритемы по ¦
¦ ¦колориметрической ¦
¦ ¦линейке (в баллах)¦
+---------------------------------------------+------------------+
¦1. Отсутствие эритемы ¦ 0 ¦
¦2. Слабая (розовый фон) эритема ¦ 1 ¦
¦3. Умеренно выраженная эритема ¦ 2 ¦
¦(розово-красный фон) ¦ ¦
¦4. Выраженная эритема (красный фон) ¦ 3 ¦
¦5. Резко выраженная эритема (ярко-красный ¦ 4 ¦
¦фон) ¦ ¦
L---------------------------------------------+-------------------
б) Оценка отека кожи животных.
Величина отека определяется путем измерения толщины кожной складки (в мм) при помощи толщиномера типа ТР-1-10.
----------------------------------------------------T------------¬
¦ Интенсивность отека ¦Оценка отека¦
¦ (увеличение толщины кожной складки, мм) ¦ (в баллах) ¦
+----------------T---------------T------------------+------------+
¦ ¦ кролики ¦ морские свинки ¦ ¦
+----------------+---------------+------------------+------------+
¦Отсутствие ¦ 0 ¦ 0 ¦ 0 ¦
¦Слабый ¦ до 0,5 ¦ до 0,3 ¦ 1 ¦
¦Умеренный ¦ 0,6 - 1,0 ¦ 0,4 - 0,6 ¦ 2 ¦
¦Выраженный ¦ 1,1 - 2,0 ¦ 0,7 - 1,0 ¦ 3 ¦
¦Резко выраженный¦ > 2,0 ¦ > 1,0 ¦ 4 ¦
L----------------+---------------+------------------+-------------
Оценка степени эритемы и отека суммируется для каждого подопытного животного, после чего вычисляется средняя оценка раздражающего эффекта для группы экспериментальных животных.
Степень выраженности раздражающего действия вещества на кожу определяется по классификации, приведенной в табл. 2.
Таблица 2
КЛАССИФИКАЦИЯ ХИМИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ ПО ВЫРАЖЕННОСТИ
РАЗДРАЖАЮЩЕГО ДЕЙСТВИЯ НА КОЖУ КРОЛИКОВ И МОРСКИХ
СВИНОК ПРИ ОДНОКРАТНОЙ АППЛИКАЦИИ
-------T---------------T-----------------------------------------¬
¦Классы¦Суммарный балл ¦ Выраженность раздражающего действия ¦
¦ ¦ раздражения ¦ ¦
+------+---------------+-----------------------------------------+
¦ 0 ¦ 0 ¦Отсутствие раздражающего действия ¦
¦ 1 ¦ 0,2 - 2 ¦Слабораздражающее действие ¦
¦ 2 ¦ 2,1 - 4 ¦Умеренное раздражающее действие ¦
¦ 3 ¦ 4,1 - 6 ¦Выраженное раздражающее действие ¦
¦ 4 ¦ 6,1 - 8 ¦Резко выраженное раздражающее действие ¦
¦ 5 ¦ ¦Чрезвычайно сильное раздражающее действие¦
¦ ¦ ¦(некроз от неразведенного продукта) ¦
¦ 6 ¦ ¦50% раствор дает некроз ¦
¦ 7 ¦ ¦25% раствор дает некроз ¦
¦ 8 ¦ ¦10% раствор дает некроз ¦
¦ 9 ¦ ¦5% раствор дает некроз ¦
¦ 10 ¦ ¦Растворы слабее 5% дают некроз ¦
L------+---------------+------------------------------------------
2. ИЗУЧЕНИЕ МЕСТНОГО ДЕЙСТВИЯ ВЕЩЕСТВА
НА СЛИЗИСТУЮ ОБОЛОЧКУ ГЛАЗА
Изучаемый продукт закапывается в конъюнктивальный мешок глаза кролика (не менее 3 животных) в количестве 1 капли. Твердые вещества вносят в количестве 50 мг (дисперсность частиц до 10 мк). После внесения вещества на 1 мин. прижимают слезно-носовой канал у внутреннего угла глаза. Внесение вещества производят однократно.
Проводят наблюдения за прозрачностью роговицы и состоянием слизистой оболочки глаза ежедневно в течение 2 недель. Регистрируют появление и выраженность гиперемии и отека слизистой оболочки глаз, инъекцию сосудов склеры и роговицы.
Оценку повреждающего действия химических соединений на слизистую оболочку глаза кролика по степени гиперемии и отека, а также количеству выделений возможно проводить по балльной системе, предложенной A. Majda и K. Chuscielska (Medicine Pracy, XXIV, 1973, 3, 321 - 336; Приложение 2).
Развитие изъязвлений слизистой оболочки глаз, помутнения роговицы, рубцовых изменений век свидетельствует о наличии у вещества резко выраженного раздражающего эффекта.
3. ИССЛЕДОВАНИЕ РАЗДРАЖАЮЩИХ СВОЙСТВ ВЕЩЕСТВА
ПРИ ИНГАЛЯЦИИ
О выраженности раздражающих свойств вещества при ингаляции
судят по величине Lim для экспериментальных животных (белых
ir
крыс) и человека. Классификация раздражающих веществ по величине
Lim приведена в Приложении (Приложение 3).
ir
3.1. Определение порога раздражающего действия вещества при
ингаляции для белых крыс.
При установлении Lim промышленных веществ в эксперименте на
ir
животных необходимо проводить комплексное исследование
функционального состояния дыхательной системы и использовать
показатели, отражающие состояние ее различных отделов. Наиболее
ранними проявлениями раздражающего действия промышленных ядов при
ингаляции являются изменения частоты дыхания и чувствительности
обонятельного анализатора, усиление миграции клеточных элементов
на поверхность слизистой оболочки верхних дыхательных путей и
легких, развитие паранекротических изменений в ткани легких,
угнетение активности сурфактанта легких.
Экспозиция - однократно, 4 часа.
Вид животных - белые крысы, масса тела 180 - 240 г.
Минимальная статистическая группа - 10 особей.
Обследование животных проводится непосредственно после
окончания затравки.
Определение Lim целесообразно начинать с концентраций
ir
вещества на уровне Lim . В дальнейшем (в зависимости от
ас
полученного результата) изучаемые концентрации вещества понижают
или повышают в 2 - 3 раза. Во всех случаях необходимо установление
концентрации изучаемого вещества, не оказывающей раздражающего
эффекта на дыхательную систему экспериментальных животных. За
Lim принимается минимальная концентрация изучаемого химического

ПРИКАЗ Минздрава СССР от 07.08.1980 n 855 О ПОРЯДКЕ ВВЕДЕНИЯ В ДЕЙСТВИЕ ЗАКОНА СССР ОБ ОХРАНЕ АТМОСФЕРНОГО ВОЗДУХА  »
Документы СССР »
Читайте также